DB32T 2570-2013 鸡传染性法氏囊RT-LAMP 诊断技术规程　.pdfVIP

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B22

备案号：40456-2014DB32

江苏省地方标准

DB32/T2570-2013

鸡传染性法氏囊RT-LAMP诊断技术规程

TechnicalcodeofdetectingRT-LAMPforInfectiousBursalDisease

2013-12-20发布2014-01-20实施

江苏省质量技术监督局发布

DB32/T2570-2013

前言

为规范鸡传染性法氏囊RT-LAMP诊断技术规程，提高鸡传染性法氏囊病毒检测的灵敏度、稳定性、

特异性，特制定本标准。

本标准按GB/T1.1-2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构和编写》要求编写。

本标准的附录为规范性附录。

本标准由江苏省农业科学院提出。

本标准起草单位：江苏省农业科学院。

本标准起草人：刘宇卓、李银、黄欣梅、赵冬敏、韩凯凯、张敬峰。

DB32/T2570-2013

鸡传染性法氏囊RT-LAMP诊断技术规程

1范围

本标准规范了鸡传染性法氏囊RT-LAMP诊断技术规程所用引物、所涉及的样品范围、操作流程、反

应条件等技术标准。

本标准适用于鸡传染性法氏囊病毒病的实验室诊断、临床诊断、流行病学调查、分离毒株的鉴定。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB16548-2006病害动物和病害动物产品生物安全处理规程

NY/T541-2002动物疫病实验室检验采样方法

DB13/T500商品肉鸡传染性法氏囊病防治技术规程

3主要试剂和仪器

3.1DNAMarkerDL-2000

3.26xLoadingbuffer

3.3BstDNAPolymerase

3.4MgSO

3.5DEPC

3.6Betaine

3.710XThermoPolbuffer

3.8异丙醇

3.9无水乙醇

3.10琼脂糖

3.11核酸染料

3.12氯仿

3.13电泳仪

3.14电热恒温水槽

4引物

GenBank(IBDV)A(GenBankAY444873),VP3

按照上公布的鸡传染性法氏囊病毒节段的基因序列在

基因保守区域利用LAMPprimerdesigningsoftwarePrimerExplorer设计一套引物，序列为：

F3:5′一CCAACTGGGCGACGTTTA一3

B3:5′一CAGAATGGAACAGTGGGTCC一3

FIP:5′一GTCCTGCATTGGGTGGAAGGTATTTTTTTTCCTCACAATCCACGCG一3

BIP:5′一CTGGCTATGGCCGCTTCAGATTTTTGCTGCTTCCATGGCTCT一3

5临床诊断

DB32/T2570-2013

按照DB13/T500商品肉鸡传染性法氏囊病防治技术规程中4.1流行特点、4.2临床症状、4.3.1剖

检病变进行。

6采样和样品的处理

6.1病料的采集及处理

按照NY/T541-2002动物疫病实