临床生化检验方法的选择和评价.pptVIP

*结果分析(1)作图分析1)差异分析2)对比分析––差异图:Y轴:试验方法与比较方法之差X轴:比较方法的测定值––对比图:Y轴:试验方法测定值X轴:比较方法的测定值*差异分析图对比分析图比较方法结果零线差异（试验－比较）比较方法结果测定方法结果*2．回收试验所谓回收即分析方法正确测定加入常规分析样品中的纯分析物的能力。目的是测定比例系统误差，以衡量候选方法的准确度。

（1）方法：将被分析的纯品标准液加入样品中，成为分析样品，原样品加入同量的无分析物的溶液作基础样品，然后用实验方法分析，两者测定结果的差值为回收量。

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（2）回收率计算：理想的回收率为100%，如某法测血钙的回收率为95.7%，有4.3%的比例误差，表明一个含钙真值为2.5mmol/l的标本,若用该方法测定,约为2.39mmol/l(2.5×95.79%)，误差为0.11mmol/L(2.5×4.3%)。*（3）注意事项：①准确吸量,因为被分析物的理论值是根据加入标准液体积及原样品的体积计算所得，吸量稍有不准，就会影响结果；②样品中加入标准液后,总的浓度必须在方法的分析范围内，一般须加入高、中、低不同浓度做回收试验，计算平均回收率；③加入标准液后，最好使实验样品的被测浓度达到医学决定浓度；④加入标准液的体积一般在10%以内。若稀释过大，误差将发生改变，甚至消失。*（三）线性评价1．目的要求线性范围是分析方法的一个重要技术指标，它能判断对某一分析方法测得的浓度或活性值与设定的浓度或活性值之间的比例关系的范围。常规方法应具有较宽的分析范围，一般应覆盖临床可能出现的高值。

*2．评价前准备①熟悉仪器、评价方案和试剂。②评价标本的介质应与实际测定的标本相一致，理想的标本是病人的低值或高值标本，这往往不易收集到，亦可用病人的混合标本加入分析物作为高值标本，用正常人标本作为低值标本。③浓度范围应以分析项目的线性要求为准。*线性评价应有5个不同浓度，可选择低值和高值标本各一个，低值标本为1号，高值标本为5号，二者3：1混匀为2号，等份混匀为3号，1：3混匀为4号，2-4号标本的浓度按下式计算：

标本浓度=（C1V1+C5V5）/（V1+V5）C：浓度，V：体积。*（四）干扰试验1．目的要求判断评价方法给出的结果是否受非分析物影响及影响程度。①干扰是指在测定某分析物的浓度或活性时，受另一非分析物影响而导致测定结果增高（正干扰）或降低（负干扰）。②干扰物质可分为内源性（标本中存在的）和外源性（外界污染的）两类。*③干扰的机理，可有物理作用、化学作用以及非特异反应等。④干扰可能是造成误差的一个重要原因，如果干扰物是恒定的将引起恒定误差，如干扰物随病理生理因素影响，将引起随机误差。因此，实验室应了解各种测定方法的干扰情况

*2．试验前准备①应做的主要干扰物为病人标本中常常出现的黄疸，脂血和溶血；某些药物如维生素C等；实验常用的抗凝剂，防腐剂和稳定剂。②质量保证，不存在系统误差；批内精密度在可接受范围内；应不存在前后结果的交叉污染；实验过程有质控监督。

*3．干扰试验方法

(1)配对差异试验:即将不同浓度的干扰物加入到实验标本中，然后分别测定加与不加干扰物的标本，比较二者有无偏差，并了解干扰物浓度与偏差程度的关系。

(2)用病人标本作偏差分析:*第三节方法学评价实验（举例）一、批内重复性实验重复性试验依据时间间隔可分为批内、天内、天间三种重复性试验。方法学评价重复性试验应由实验者作批内(或天内)及天间重复性试验。

*【目的与要求】掌握方法学重复性实验的设计原理和基本方法及统计分析；熟悉重复性实验的注意事项和评价标准。客观评价GOD-POD法测血糖随机误差的大小。

*【原理】批内重复性试验是指在相同条件下对同一标本在尽可能短的时间内进行m轮，每轮n次重复测定，以获得批内精密度数据的试验方法。其结果能反映各次测定结果相互接近的程度，用于客观评价GOD-POD法测血糖随机误差的大小。

【操作步骤】

将血清标本用GOD-POD法作5轮，每轮4次血糖测定，即可获得20个测定数据。*【结果计算】1．检验20次测定数据中的离群值（用Grubbs检验准则，检验离群值）2．按照批内精密度的计算公式计算5轮每轮4次测定值的平均数()、标准差(S)和变异系数(CV%)。***【评价标准】

如试验求得的血清葡萄糖GOD-POD测定法的CV值＜WHO对中等实验室提出的OCV(±3%)标准，即表明实验条件的控制达到最