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沙门氏菌检测知识详解

一、沙门氏菌简介：

沙门氏菌是一种常见的食源性致病菌，属肠杆菌科，革兰氏阴性肠道

杆菌。分为伤寒沙门氏菌、副伤寒沙门氏菌和非伤寒沙门氏菌等多种类型，

不同类型的沙门氏菌可引发伤寒、副伤寒、发热、腹痛等。不同年龄段的

人群均可因感染沙门氏菌而发病，由于婴幼儿免疫系统较为脆弱，特别是

高度易感婴儿（包括早产儿、低出生体重婴儿、免疫缺陷婴儿等），一旦

被喂食受沙门氏菌污染的婴幼儿配方乳粉，极易被感染致病，出现发烧、

腹泻等肠炎症状，严重的可能引发败血症，甚至死亡。

二、沙门氏菌生物学特性：

肠杆菌科，沙门氏菌属，6个亚属I-VI，亚属III称为亚利桑那菌。

沙门氏菌为革兰氏阴性菌，短杆菌，无芽孢，无荚膜，周生鞭毛，有动力

（也有无动力的变种），需氧兼性厌氧，35℃~37℃为最适生长温度，

pH6.8~7.8为最适，能在营养琼脂上生长，菌落直径2~3mm，圆形或卵形，

无色半透明，液体培养基中混合均匀生长。

不发酵乳糖、蔗糖，不液化明胶，不能分解蛋白质，也不产生靛基质，

不分解尿素，有规律的发酵葡萄糖并产生气体。

与埃希氏菌属的主要区别在硫化氢反应和乳糖反应。

对热及外界环境抵抗力中等，60℃20-30min即被杀死，普通水中不易

繁殖但可存活2-3周，自然环境粪便中生存1-2月，干燥垫草中生存8-20

周，冰箱中生存3-4月，-5℃存活10月；

对化学药品抵抗力较弱，对氯霉素敏感，5%苯酚5min即可杀死，胆盐、

煌绿及孔雀绿抑制作用大但对肠杆菌抑制作用弱，可用以制备选择性培养

基。

三、沙门氏菌抗原构造和分类：

菌体抗原，记为O抗原，多糖-类脂-蛋白质复合物，加热至100℃2.5h

不能被破坏，也不能被乙醇和0.1%石碳酸破坏，多糖决定O抗原特异性，

用于分群。

鞭毛抗原，记为H抗原，蛋白质，不耐热，60℃15min或乙醇处理后

被破坏，沙门H抗原有两种，第一相特异相，第二相非特异相，用于分型。

表面抗原，要求掌握Vi抗原，糖脂，60℃30min或100℃5min即可破坏，

可阻止O抗原与O抗体的特异性凝集反应，但Vi抗原被破坏后O抗体仍

可和相应的O抗原凝集。

四、变异性

S-R初次分离菌株一般是光滑型，经长期人工传代培养，菌体特意多糖

抗原丧失，在盐水中自凝。

H-O有鞭毛的细菌失去鞭毛的变异。

位相变异双相H抗原的沙门氏菌变成只有其中某一相H抗原的单相

菌。

沙门氏菌血清学分型时，如遇到单相菌，特别是只有第二相时，需反

复分离和诱导出第一相方可鉴定。

V-W失去Vi抗原

五、检验原理

食品中沙门氏菌含量较少，且常由于食品加工过程使其受到损伤而处

于濒死状态，所以对某些加工食品（一般生鲜蛋或肉类）必须经过前增菌

处理，即无选择性的培养基使其恢复活力，再进行选择性增菌，使沙门增

殖，其他大多数细菌收到抑制。

利用沙门的生化特征，借助于三糖铁、靛基质、尿素、KCN、赖氨酸

等试验可与肠道其他菌属相鉴别。

通过菌种特殊的抗原结构（O抗原为主），可以把他们分辨出来。

复活（前增菌）→培养（选择性增菌）→分离（平板划线分离培养）→

鉴定（生化鉴定/血清鉴定）

六、操作步骤

1、前增菌

25g（ml）检样放入225ml缓冲蛋白胨水BPW（BufferedPeptoneWater）

均质（建议拍打式均质器），36℃±1℃培养8~18h。

酸性或碱性样品需用1mol/ml无菌氢氧化钠或盐酸调节pH至6.8±0.2，

用试纸测量。

2、增菌

摇动增菌培养物，移1ml转种于10ml四硫磺酸钠煌绿TTB增菌液中，

42℃±1℃培养18~24h。适合除伤寒副伤寒沙门氏菌培养。浅黄色。

同时，移1ml转种于10ml亚硒酸盐胱氨酸SC增菌液中，36℃±1℃培

养18~24h。适合伤寒副伤寒沙门氏菌培养。

亚硒酸氢钠对革兰氏阴性菌G-有毒，磷酸盐中和毒性，促沙抑大，亚

硒酸盐还原时，pH上升，乳糖分解产酸，磷酸盐缓冲，维持