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黄牛改良人工授精技术规范

1范围

本文件规定了牛冷冻精液人工授精的操作技术要求。

本文件适用于黄牛改良人工授精技术应用。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB4143牛冷冻精液

GB/T5458液氮生物容器

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1黄牛改良

父本选择优良性状的中国荷斯坦牛冷冻精液（细管冻精），母本选用本地黄母牛进行杂交改良。3.2冷冻精液

将原精液用稀释液等温稀释、平衡后快速冷冻，在液氮中保存。冷冻精液包括颗粒冷冻精液和细管冷冻精液。

3.3冷冻精液解冻

冷冻精液使用前使冷冻精子重新恢复活力的处理方法。

3.4人工授精

用人工方法采取公牛精液，经检查处理后，输入发情母牛生殖道内，使其受胎的技术。

3.5发情鉴定

通过外部观察或其他方式确定母牛发情程度的方法。

3.6受胎率

同期受胎母牛数占同期参加输精母牛数的百分比。

4牛的基本条件

4.1种公牛和精液品质

NY/T1335-2007

应符合GB4143

4.2母牛

健康、繁殖机能正常的母牛（要求黄母牛年龄在3岁左右，平均体重达到200㎏以上）。5输精准备

5.1器械清洗和消毒

凡是接触精液和母牛生殖道的输精用器具都应进行清洗和消毒（金属输精器类洗净后，置紫外线消毒柜内，自然冷却待用）。

5.2冷冻精液的贮存

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冷冻精液应浸泡在液氮生物容器中贮存，液氮生物容器应符合GB/T5458有关规定。包装好的冷冻精液由一个液氮容器转换到另一个液氮容器时，在液氮容器外停留时间不得超过5s。

5.3冷冻精液解冻

预先将保温桶(或杯）的水温调制35-37摄氏度，打开液氮罐口塞子，确定所需细管冻精的位置，用长镊子迅速取出该细管冻精，迅速将细管投入35-37摄氏度的温水中约10-15s，待冰晶溶解后从水中取出细管，用无菌脱脂干棉球将细管表面的水擦干，用细管剪距封口端约1cm处将封口段剪断，细管断面要整齐，以防断面偏斜而导致精液逆流。

5.4精液质量检查

精液质量应符合GB4143的要求。

5.5牛体卫生

输精前，用手掏净母牛直肠缩粪后，再用温水加极少量高锰酸钾清洗母牛外阴部并擦拭干净。

5.6输精器准备

5.6.1金属输精器使用

输精枪主要用于细管冷冻精液的输精。剪去细管精液封口，剪口应正，断面应齐。将剪去封口的细管精液迅速装入输精器管内，步骤为：剪去封口端的为前端，输精器推杆后退，细管装至管内，输精器管进入塑料外套管，管口顶紧外套管中固定圈，输精器管前推到头，外套管后部与输精器后部螺纹处拧紧，全部结合要紧密。

6母牛发情鉴定

6.1外部观察

通过母牛的外部表现症状和生殖器官的变化判断母牛是否发情和发情程度。（见附录A）

7输精

7.1输精时间确定

7.1.1外部观察法

母牛接受爬跨后6h～10h是适宜输精时间。采用两次输精，第二次输精时间为母牛接受爬跨后12h～20h。青年母牛的输精时间宜适当提前。

7.2直肠把握输精法

输精人员一手五指并握，呈圆锥形从肛门伸进直肠，动作要轻柔，在直肠内触摸并把握住子宫颈，使子宫颈把握在手掌中，另一手将输精器从阴道下口斜上方约45o角向里轻轻插入，双手配合，输精器对准子宫颈口，轻轻旋转插进，过子宫颈口螺旋状皱襞1cm～2cm到达输精部位。一头母牛应使用一支输精器或者一支消毒塑料输精外套管。

7.3开殖器输精法

用开殖器打开阴门，将输精抢轻插入阴道内，对准子宫颈，快速将精液推至子宫角深部，缓慢地将输精抢撤开。

7.4输精部位

使用开殖器时应将输精枪头精液推送到子宫颈口约1/3处，而直肠把握时应到子宫角间沟分岔部的子宫体部，不宜深达子宫角部位。

8妊娠诊断

8.1外部观察

妊娠母牛外部表现发情周期停止，食欲增进，性情温和，行为变安稳。怀孕中后期腹围增大，腹壁一侧突出，乳房胀大。

8.2直肠检查

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输精后二个情期未发情（40d），通过直肠触摸检查子宫，可查出两侧子宫角不对称，孕侧子宫角较另测略大，且柔软。60d后直肠触摸可查出妊娠子宫增大、胎儿和胎膜。直肠触摸同侧卵巢较另一侧略大，并有妊娠黄体，黄体质柔软、丰满，顶端能触感突起物。

9记录

9.1配种记录表

包括母牛号、母牛发情时间、发情观察鉴定、发情后期流血时间、输精时间、冷冻精液信息（公牛号）、输精操作人员。上述内容可以表格的方式记录。（见附录B）

9.2受胎率

受胎率按如下公式