《药物分析与检验技术》课件——生物样品的处理方法.pptxVIP

生物样品的处理方法

样品制备是体内药物分析极其重要的一个环节，往往也是分析中最难、最烦琐的步骤。药物在生物样品中常以多种形式存在。生物样品的介质组成比较复杂，有大量的内源性物质。

一、样品制备方法选择的一般原则1生物样品的类型2药物的理化性质和浓度范围3药物测定的目的4样品制备与分析技术的关系

二、样品的制备方法1去蛋白法（1）加入沉淀剂和变性试剂：加入中性盐、加入酸、加入金属离子。（2）加入可与水混溶的有机溶剂：如甲醇、乙醇、丙酮、乙腈、四氢呋喃等。（3）酶消化法：最常用的酶是蛋白水解酶中的枯草菌溶素。

二、样品的制备方法2缀合物水解法（1）酸水解：通常加入适量的盐酸溶液；（2）酶水解：常用葡萄糖醛酸苷酶或硫酸酯酶或葡萄糖醛酸苷硫酸酯酶的混合酶。药物经人体代谢后，多与内源性物质结合形成缀合物经尿液排出。所以在提取之前需要将缀合物中的药物释放，常用酸水解、酶水解及溶剂水解的方法。

二、样品的制备方法3萃取分离法(1)液-液萃取法：液-液萃取法在体内药物分析中应用相当广泛，萃取一次即可除去大部分杂质，从大量的样品中提取药物经浓集后作为分析用样品，萃取时应注意溶剂的pH调节和提取溶剂的选择。

二、样品的制备方法3萃取分离法(1)液-液萃取法1）溶剂的pH调节：对于碱性药物的最佳pH要高于pKa值1～2个pH单位；对于酸性药物则要低于pKa值1～2个单位。2）提取溶剂的选择：一般选择原则是在满足提取需要的前提下，尽可能选用极性小的溶剂。

二、样品的制备方法3萃取分离法(2)液-固萃取法：将具有吸附分配或离子交换性质的、表面积大的载体作为填充剂，装于小分离管中，使生物样品的干扰物或药物保留在载体上而进行分离的方法。1）亲水性载体：硅藻土；2）疏水性或离子交换树脂载体：活性炭、聚苯乙烯、十八烷基键合硅胶等。

二、样品的制备方法4化学衍生化法在色谱过程中，用特殊的化学试剂借助化学反应给样品化合物接上某个特殊基团，使其转变为相应衍生物之后进行检测的方法。分离前将药物进行化学衍生化的主要作用是使药物变成具有能被分离的性质，提高检测灵敏度，增强药物的稳定性，以及提高对光学异构体分离的能力等。

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