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微生物实验报告

微生物试验报告1

霉菌的培育与形态学观看：试验一真菌培育基的配制与灭菌

试验目的：

（1）了解培育基的配置原理和方法，把握分别培育微生物的有关预备工作。

（2）把握高压灭菌方法及原理

试验原理：

（1）培育基的制备原理：

培育基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。

从养分角度分析：

养分：碳源、氮源、能源、生长素、水分和无机盐等；?相宜的酸碱度(pH值)和肯定缓冲力量；?肯定的氧化还原电位；?合适的渗透压。

琼脂是从石花菜等海藻中提取的胶体物质，是应用最广的凝固剂。加琼脂制成的培育基在98～100℃下溶化，于45℃以下凝固，不简单被微生物污染。但多次反复溶化，其凝固性降低。

（2）湿热灭菌原理－高压蒸汽灭菌

在密闭的蒸锅内，其中的蒸汽不能外溢，压力不断上升，使水的沸点不断提高，从而锅内温

度也随之增加。在0.1MPa的压力下，锅内温度达121℃。在此蒸汽温度下，可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。

试验材料与方法

配制培育基所需器材

试验设备：高压蒸汽灭菌器。

试验器材：500ml三角烧瓶、蓝盖瓶、5ml刻度吸管、培育基、天平、砝码、

称量纸、药勺、500ml、100ml量筒、牛皮纸、硫酸纸、橡皮筋、铁丝筐、平皿、剪刀等。

培育基等集中放讲台前高压桶内，送到洗刷室统一高压灭菌条件及留意事项

高压灭菌条件：121.3℃，15min。含糖培育基113℃，15min。

倒平板电炉加热灭菌好的培育基打开平皿包装倒平板（10块）留意事项：空气环境无菌（应在酒精灯火焰四周无菌区）。

a.在酒精灯火焰处，倾斜打开瓶口。

b.瓶口要过火焰。

c.左手掀开平皿小口。

d.倾注满皿底再多一点，约10ml（7cm直径平皿）。

e.推放一边要轻缓，不能晃起琼脂挂壁，易在培育过程中污染杂菌。

f.完全凝固再翻转平板放塑料筐内，4℃备用。

分析与争论

（1）如何证明培育基灭菌是否彻底?

把灭菌后的培育基按灭菌锅内的不同位置，每处抽取数管(瓶)，标上记号，置25℃～30℃培育一周左右进行检查。假如培育基没有什么变化，说明灭菌效果良好；假如某一位置的培育基消失了杂菌菌落，可能是摆放的太紧，导致蒸汽不畅，或锅的结构不合理等缘由所致，应依据上述状况进行改进；假如大部分或全部菌种瓶都消失杂菌，说明灭菌温度或灭菌时间不够，应提高压力或延长灭菌时间。经过几次检验都证明能彻底灭菌后，以后按同样条件灭菌的则不必进行检查。

经过几次检验都证明能彻底灭菌后,以后按同样条件灭菌的则不必进行检查。

（2）为什么说消毒与灭菌是微生物学和临床医学必不行少的基本学问?由于病原生物广泛存在于自然界，可通过不同途径和媒介进入人体，引起感染或造成疾病流行。因此，杀灭或清除存在于体外传播媒介上的病原生物，对于切断传播途径、预防和掌握其感染具有重要意义。自古以来，人们就利用煮沸、火烧、日晒等方法杀灭或去除微生物，达到预防疾病的目的。实际上，除了在临床医疗实践中需要防止微生物的污染或感染外，在微生物学试验室、食物保存、饮水净化、药品与生物制品生产等过程中都需要避开微生物的.污染。

试验二霉菌的接种与培育

试验目的与要求：把握霉菌与酵母菌的接种与培育方法。

试验原理：

接种是微生物试验及科学讨论中一项基本操作技术。依据试验目的和要求，

选择合适的接种工具与接种方法，接种工具有接种环、接种针、接种铲、接种钩、吸管、滴管、棉签等。常用接种方法有：斜面接种，液体接种，穿刺接种，平板接种和固体接种。接种的关键是无菌操作。

无菌操作的原则：在酒精灯火焰旁进行，全部器皿均须严格消毒，培育基应事先做无菌试验，

接种工具使用前后须经火焰烧灼灭菌，棉塞不能乱放，始终夹在手指中。在培育四大类微生物时应留意选择相宜的培育条件。多数细菌为专性需氧菌与兼性需氧菌，少数为厌氧菌。多数食品腐败菌和工业用菌种，以及人和动物病原菌的最适生长温度为37℃，并且在近中性（PH6.5～7.5）条件下生长良好。多数放线菌为好氧菌，少数为厌氧菌，最适生长温度为28～30℃，多数相宜在偏碱性环境中生长（PH7.5～8.5）。

试验材料与方法

（1）试验材料：试验设备：温箱。

试验器材：毛霉、曲霉、青霉、根霉、啤酒酵母、白假丝酵母、新生隐球酵母菌、细黄链霉菌、PDA平板、高盐察氏平板、高氏合成I号平板、塑料筐、20