热点05基因工程的典型题分析.docx

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热点05基因工程的典型题分析

知识点一：限制酶的选择原则

(1)不破坏目的基因原则：如图甲中可选择PstⅠ，而不选择SmaⅠ。

(2)保留标记基因原则：质粒作为载体必须具备标记基因，所以所选择的限制酶尽量不要破坏这些结构，如图乙中不选择SmaⅠ。

(3)确保出现相同黏性末端原则：通常选择与切割目的基因相同的限制酶，如图甲中PstⅠ；为避免目的基因和质粒自身环化和随意连接，也可使用不同的限制酶切割目的基因和质粒，如图甲也可选择PstⅠ和EcoRⅠ两种限制酶。

知识点二．筛选合适的目的基因

（1）较为有效的方法：从相关的已知结构和功能清晰的基因中进行筛选。

（2）实例：在培育转基因抗虫棉之前

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