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多基因突变检测在甲状腺穿刺细胞学辅助诊断中的应用

【摘要】目的评价9基因突变检测作为细胞学诊断不明确甲状腺病变的鉴别诊

断方法和甲状腺细针穿刺细胞学检查的平行诊断方法的意义。方法2014年12

月至2021年4月在中国医学科学院肿瘤医院行甲状腺细针穿刺细胞学检查的54

4例患者的579个甲状腺结节，收集其细胞学诊断后剩余的液基细胞学样本，采

用下一代测序技术检测B-Raf原癌基因（BRAF）、成神经细胞瘤大鼠肉瘤病毒癌

基因同源物（NRAS）、Harvey大鼠肉瘤病毒癌基因同源物（HRAS）、Kirsten

大鼠肉瘤病毒癌基因同源物（KRAS）、肿瘤蛋白p53（TP53）、端粒酶逆转录酶

（TERT）、磷脂酰肌醇-4，5-二磷酸3-激酶催化亚基α（PIK3CA）、鸟苷酸结

合蛋白活性刺激肽（GNAS）和转染重排（RET）这9个基因任何癌症体细胞突变

目录所收录位点的突变状态。以术后组织病理诊断和明确的细胞学诊断为金标准，

比较9基因突变检测与BRAFV600E单基因检测的诊断效力。结果579个甲状腺

结节中，细针穿刺细胞学诊断196个为BethesdaⅡ级，11个为BethesdaⅢ级，

31个为BethesdaⅣ级，27个为BethesdaⅤ级，314个为BethesdaⅥ级；9

基因突变检测阳性275个，突变率为47.5%。手术切除的329个甲状腺结节中，

术后病理诊断30个为良性，5个为交界性，294个为恶性。将交界性结节视为恶

性结节时，299个恶性结节中9基因的突变率由高到低依次为BRAF62.21%（18

6/299），NRAS5.02%（15/299），HRAS1.00%（3/299），PIK3CA0.67%（2/

299），GNAS0.67%（2/299），KRAS0.33%（1/299），TP530.33%（1/299），

TERT0.33%（1/299），RET0.00%（0/299）。9基因突变的恶性风险由高到低

依次为BRAF100%（186/186），PIK3CA100.00%（2/2），GNAS100.00%（2/2），

TERT100.00%（1/1），TP53100.00%（1/1），NRAS78.95%（15/19），HRAS

75.00%（3/4），KRAS50.00%（1/2）。对于细胞学诊断为BethesdaⅢ～Ⅳ级

（诊断不明确）的甲状腺结节，9基因突变检测诊断甲状腺癌的灵敏度为34.48%

（10/29），特异度为61.54%（8/13），准确率为42.86%（18/42），而BRAF

V600E单基因检测诊断甲状腺癌的灵敏度为0。对于细胞学诊断为BethesdaⅡ～

Ⅵ级的甲状腺结节，9基因突变检测诊断甲状腺癌的灵敏度为68.83%（254/369），

特异度为90.00%（189/210），准确率为76.51%（443/579），受试者工作特征

曲线的曲线下面积（AUC）为0.79；BRAFV600E单基因检测诊断甲状腺癌的灵敏

度为63.69%（235/369），特异度为99.52%（209/210），准确率为76.68%（44

4/579），AUC为0.82。BRAFV600E单基因检测的特异度高于9基因突变检测（P

＜0.01），而灵敏度、准确率和AUC与9基因突变检测差异无统计学意义（均P

＞0.05）。有4个诊断为甲状腺乳头状癌的结节和1个诊断为甲状腺滤泡癌的结

节检测到提示不良预后的基因突变，其中2个结节检测到TERT与BRAFV600E共

突变，2个结节检测到PIK3CA突变，1个结节检测到TP53突变。结论作为细

胞学诊断不明确的甲状腺病变（BethesdaⅢ～Ⅳ级）的鉴别诊断方法时，9基

因突变检测优于BRAFV600E单基因检测。作为甲状腺细针穿刺细胞学检查的平

行诊断方法时，9基因突变检测的诊断效力与BRAFV600E单基因检测相当，并

且9基因突变检测可以检测出个别提示不良预后的基因突变，对这些有特殊基因

改变患者的临床管理有一定参考价值。

【关键词】甲状腺肿瘤；细针穿刺术；细胞学；基因突变检测；诊断

细针穿刺是一种快速、安全且可靠的检查方法，在甲状腺癌的术前诊断中发

挥着关键作用［1］。在进行细针穿刺的甲状腺病变中，约20%细胞学诊断不明

确［2］，包括按照甲状腺细胞病理学Bethesda报告系统（theBethesdaSyst

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