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温度控制系统在PCR仪中的应用
作者:陈辉郭义超
来源:《电子世界》2013年第05期
【摘要】介绍了PCR仪的温度控制系统的工作原理,并对温度控制系统软硬件进行了设
计,提高了温度控制系统的升降温速度,具有广泛的应用前景。
【关键词】PCR;温度控制系统;pt100
引言1.
聚合酶链式反应(PolymeraseChainReaction,简称PCR),又称无细胞分子克隆或特异
性DNA序列体外引物定向酶促扩增技术。PCR技术应用非常广泛,广泛应用在生命科学研
究、生化分析、临床诊断、药物分析、法医鉴定和疫情快速检验等各个领域。
温度控制系统的主要任务就是让样品内基因在腔体内进行高温变性(T1)、低温退火
(T2)和适温延伸(T3)三个温度阶段的反复循环,使样品内基因完成增殖。温控系统升降
温工作循环曲线如图1所示。
目前,PCR检测仪的变温方式主要有两种,分别是变温铝块及变温气流。其优缺点为变温
铝块方式应用比较广泛,升降温速率比变温水浴要快,但因PCR管与铝块不可能完全贴使之
温度均匀性较差。半导体制冷片变温结构简单,只需向半导体制冷片通电即可加热,改变电压
极性即可制冷,所以变温速度较快,但是半导体制冷片容易损坏。变温气流方式,即采用电热
丝进行加热,吹入冷空气进行制冷。通过调节功率输出的占空比,就可以调节温度的大小,从
而可以实现对温度的升温、降温和恒温的自动控制。另一方面,由于传递热量的介质为空气,
空气可以和样品之间实现无缝接触,从而样品溶液的吸热和散热的速度就会很快。
本研究设计并实现了一套适用于实时PCR仪的温度控制系统。系统采用变温气流的方式
进行加热,使用常规PID算法进行温度控制。升降温速度极快,实时性强、升降温周期短,为
研制商品化的实时定量PCR仪奠定了基础。
系统2.结构
温度控制系统的机械结构主体是一个风腔,采用电热丝加热,冷空气制冷。风腔设有进风
口和出风口,风门由步进电机控制,可以任意控制风门的旋转角度,从而达到通过风门改变腔
体内的空气流动特性,主要作用是让冷空气进入腔体,热空气从腔体流出,带走热量,达到制
冷的作用。腔体内部安装有横流风机,用于加快腔体内部的空气流动,在加热时保持腔体内部
空气温度的均匀,在制冷时加快空气流动达到腔体快速降温。腔体上设有装样品的盖口,用于
放置样品。腔体内部结构示意图如图2所示。
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温控控制系统的硬件执行部件主要包括一个横流风机、两个步进电机、两个霍尔信号传感
器、温度采集模块以及加热与制冷模块。图3是整个温度控制系统的具体组成框图。
温度控制包括制冷模块和加热模块,制冷模块主要包括两个风门、一个风机。两个风门分
为进风门和出风门,由步进电机控制。风机的主要作用是加快内腔空气流动,保持内腔温度均
匀一致,而在降温过程中吹动从风门进入的冷空气,并将风腔内的热空气吹出,达到空气制冷
效果。随着冷空气的不断进入,热空气的不断流出,样品温度会不断降低。加热模块主要包括
加热装置和加热控制电路两部分。本温控系统采用变温空气加热方式,加热装置选用的电热丝
的方式进行加热,而加热控制部分主要是对电热丝的通断控制,从而实现对加热量的控制。
对电热丝加热功率的控制采用PWM控制技术。图4是PWM控制示意图,ON是一个脉
冲周期内高电平持续时间,假设当单片机的I/O口为高电平时加热模块工作,则该PWM的占
空比=ON/脉冲周期。一般情况下加热的周期都是固定的,所以ON的大小直接决定了PWM占
空比的大小,进而影响加热器的功率。而通过模糊PID运算可以得到控制量u(k)的值,并
把u(k)的值转化为百分比,然后乘以周期时间,则可以得到ON值,从而得到该周期内加
热模块工作的时间,实现对温度的有效控制。
温度采集模块主要由温度传感器、温度变送器、A/D数据采集三大部分组成。由于本温控
系统控温范围在50℃~100℃,属于中低温测温范围,且对温度测量精度有较高的要求。基于
热电阻式温度传感器的测量精度
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