人教版高考生物学一轮总复习精品课件 第10单元 生物技术与工程 专题精研课13 PCR技术中引物的拓展应用.ppt

下列说法错误的是()A.做RT-PCR之前,需要先根据cDNA的核苷酸序列合成引物和探针B.RNA不能作为PCR扩增的模板,故需要将样本中的RNA逆转录为DNA后再进行扩增C.若检测结果有强烈荧光信号发出,说明被检测者没有感染病毒D.病毒的检测还可以检测病毒表面的物质或病毒引发产生的抗体,其原理都是抗原—抗体杂交C解析PCR扩增必须以DNA为模板,RNA不能作为PCR扩增的模板,所以需要将样本中的RNA逆转录为DNA后再进行扩增,B项正确;若检测结果有强烈荧光信号发出,说明被检测者极有可能感染了病毒,C项错误。2.(2023·山东烟台联考)荧光定量PCR技术可定量检测样本中某种DNA含量。其原理是在PCR体系中每加入一对引物的同时加入一个与某模板链互补的荧光探针,荧光探针两端分别标记一个荧光发射基团和一个荧光淬灭基团,探针完整时,发射基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收,荧光监测系统接收不到荧光信号。当耐高温的DNA聚合酶催化子链延伸至探针处,会水解探针,使荧光监测系统接收到荧光信号。即每扩增一次,就有一个荧光分子生成(如图所示)。下列相关叙述正确的是()A.扩增过程中引物先于探针结合到模板DNA上B.在PCR系统中需加入解旋酶C.荧光信号积累越多,说明PCR循环次数越多D.若扩增n次,则其需要消耗2n-1个探针C解析基因扩增过程中需要特定的引物,该引物的作用是定位基因的位置,与模板链结合并为子链的延伸提供起点,扩增过程中引物和探针应同时结合到模板DNA上,A项错误;在PCR反应系统中无需加入解旋酶,可通过高温解旋DNA,B项错误;据题干信息“即每扩增一次,就有一个荧光分子生成”可知,荧光信号积累越多,说明PCR循环次数越多,C项正确;据题干信息“在PCR体系中每加入一对引物的同时加入一个与某模板链互补的荧光探针”,即每个DNA分子需要1个探针,扩增n次,可得到2n个DNA分子,则共需要消耗2n-1个探针,D项错误。3.(不定项)(2023·江苏百校联考)重叠延伸PCR技术是一种通过寡聚核苷酸链之间重叠的部分互相搭桥、互为模板,经过多次PCR扩增,获得目的基因的方法。该技术在扩增较长片段的DNA、不同来源的DNA片段拼接、基因的定点诱变等方面具有广泛的应用前景,下图表示利用重叠延伸PCR技术扩增某目的基因的过程。下列叙述正确的是()A.引物中C+G的含量越高,引物与模板DNA结合的稳定性越高B.在第一阶段由于引物2和引物3发生碱基互补配对,因此两者置于不同反应系统中C.引物1、2组成的反应系统和引物3、4组成的反应系统中均进行一次复制后,共产生4种双链DNA分子D.在引物1、2组成的反应系统中,经第一阶段要形成图示双链DNA,至少要经过3次复制AB解析C与G之间有3个氢键,A与T之间有2个氢键,因此引物中G+C的含量越高,引物与模板DNA结合的稳定性越高,A项正确;由图可知,引物2和引物3分别作用于同一段DNA的两条链,二者会发生碱基互补配对,因此需将它们置于不同反应系统中,B项正确;引物1、2组成的反应系统和引物3、4组成的反应系统中均进行一次复制后,各产生2种双链DNA分子,由于引物1和引物4合成的DNA属于同一种DNA,因此共产生了3种双链DNA分子,C项错误;在引物1、2组成的反应系统中,经第一阶段要形成题图所示双链DNA,至少要经过2次复制,D项错误。专项突破1.(2023·河北石家庄模拟)如图是快速RT-PCR过程示意图,①和②为逆转录酶催化的逆转录过程,③是PCR过程。据图分析,下列叙述错误的是()A.逆转录酶具有DNA聚合酶的能力B.③PCR过程只需要引物bC.RT-PCR可检测基因表达水平D.RT-PCR可检测新冠病毒等RNA病毒B解析③PCR过程需要引物a、b,因为后续的模板链序列既有与靶RNA一致的,也有与cDNA一致的,B项错误。2.利用重叠延伸PCR技术进行定点突变,可以实现对纤维素酶基因的合理性改造,其过程如图所示。下列说法错误的是()A.产物AB是依赖引物a和引物b扩增的结果B.引物c和引物b上均含有突变的碱基序列C.①过程需要先加热至90℃以上后再冷却至50℃左右D.②过程需要利用引物a和引物d获得突变产物ADD解析PCR技术中DNA单链延伸的方向是沿着引物的5端向3端延伸的,据此可分析,PCR1过程中的产物AB是依赖引物a和引物b扩增的结果,引物c和引物b分别与DNA的两条链互补,若引物c和引物b完全与模板互补,则引物c和引物b会发生互补,导致引物失效,故引物c和引物b上均含有与模板链不能互补的碱基,均应含有突变的碱基序列,A、B两项正确;①过程是双链DNA解