2.2动物细胞融合和单克隆抗体课件-高二下学期生物人教版（2019）选择性必修3.pptx

二、植物体细胞杂交技术课前提问胰蛋白酶处理取动物组织分散成单个细胞细胞悬液加培养液转入培养液中进行培养离心法收集细胞并制成细胞悬液原代培养分裂受阻转入新的培养液中进行培养传代培养分瓶培养

第2章细胞工程本节聚焦:什么是动物细胞融合技术？单克隆抗体是如何制备的？在临床上有哪些应用？第2节动物细胞工程(二)动物细胞融合和单克隆抗体（2课时）

从社会中来运用植物体细胞杂交技术，可培育新的作物类型那么，能不能让不同种动物的体细胞进行杂交，培育出集不同细胞优势于一身的动物细胞呢？

1.动物细胞融合的原理是什么？2.所形成的杂种细胞有什么特点？3.诱导动物细胞融合的方法有哪些？与植物细胞融合技术相比，特有的是哪种方法，其原理是怎样的？任务：根据概念，分析以下问题：一、动物细胞融合技术原理：细胞膜的流动性1.动物细胞融合的概念：具有两个或多个细胞的遗传信息PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法灭活病毒诱导法就是使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。

灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏它们的抗原结构。灭活病毒诱导细胞融合的原理是：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。动物细胞融合完成的标志：相关信息灭活病毒融合原理融合后形成单核细胞细胞核的融合

一、动物细胞融合技术2.意义：突破___________的局限，使__________成为可能。成为研究_________、_________、肿瘤和培育新品种的重要手段;并用于制备___________。细胞遗传细胞免疫单克隆抗体有性杂交远缘杂交3.应用：（主要）

植物体细胞杂交动物细胞融合原理细胞融合前的处理方法诱导细胞融合的方法细胞融合成功的标志主要用途意义细胞膜的流动性、细胞膜的流动性用去除细胞壁用使细胞分散成单个细胞电融合法、离心法；聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+-高pH融合法聚乙二醇PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导法再生出细胞壁细胞核的融合获得完整的杂种植株主要用于制备单克隆抗体打破生殖隔离，实现远缘杂交动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较归纳总结植物细胞的全能性果胶酶和纤维素酶胰蛋白酶或胶原蛋白酶

这个场景大家再熟悉不过了出外做核酸太麻烦，在家如何确定自己是否“阳”了？

单克隆抗体

1.传统生产抗体的方法是怎样的?有何缺限？单克隆抗体：由单一B淋巴细胞克隆（增殖）的细胞群产生的特异性抗体。如何得到能产生抗体且增殖能力强的细胞？(P49第一段第1、2句)思考与讨论单克隆抗体2.分析概念中“单”和“克隆”的含义。总结单克隆抗体的概念？

单克隆抗体制备的思路融合细胞动物细胞培养单克隆抗体动物细胞融合骨髓瘤细胞（能大量增殖）一种B淋巴细胞（只分泌一种特异性抗体）1975年，米尔斯坦和柯勒1984年，诺贝尔生理学或医学奖杂交瘤细胞具体流程应该怎样操作呢？

1.如何获得能产生新冠病毒抗体的B淋巴细胞？2.如何诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合？3.初始的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均有多个，融合后得到的细胞是否都是杂交瘤细胞？如何筛选出杂交瘤细胞？筛选出来的杂交瘤细胞有什么特点？4.小鼠在生活中还会受到其他抗原的刺激，杂交瘤细胞是否都能分泌新冠病毒抗体？5.如何筛选出能分泌新冠病毒抗体的杂交瘤细胞？6.经筛选后得到的杂交瘤细胞的数量有限，怎样获得大量的单克隆抗体？7.单克隆抗体制备过程中用到的技术手段有哪些？原理是什么？二、单克隆抗体制备的过程任务：根据课本流程图，回答以下问题：

二、单克隆抗体制备的过程任务：根据课本流程图，回答以下问题：问题1：如何获得能产生新冠病毒抗体的B淋巴细胞？给实验小鼠注射灭活的新冠病毒（特定的抗原）问题2：如何诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合？培养骨髓瘤细胞聚乙二醇（PEG）融合法电融合法灭活病毒诱导法问题3：初始的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均有多个，融合后得到的细胞是否都是杂交瘤细胞？不都是

问题3：初始的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均有多个，融合后得到的细胞是否都是杂交瘤细胞？应该如何筛选出杂交瘤细胞？筛选出的杂交瘤细胞有什么特点？未融合、B与B、瘤与瘤、杂交瘤细胞用选择培养基进行筛选，只有融合的杂交瘤细胞才能生长。二、单克隆抗体制备的过程不都是B-BB-LB-LB-LL-L选择培养基杂交瘤细胞多种杂交细胞既能迅速大量增殖，又能产生抗体

补充资料：第一次筛选获得杂交瘤细胞1.细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基喋呤阻断。2.人淋巴细胞中有这两种DNA的合