有哪些信誉好的足球投注网站- 1、本文档共11页，可阅读全部内容。
- 2、有哪些信誉好的足球投注网站（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 5、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 6、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 7、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 8、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
必威体育精装版资料整理推荐
中国海洋大学实验报告
姓名：常天易系年级：海洋生命学院2012级专业：生物科学
科目：分子细胞生物学实验学号：12050011006
PEG介导的动物细胞融合技术
一、实验目的
（１）、通过实验，对体细胞融合有一个清醒的认识
（２）、通过ＰＥＧ介导鸡血细胞融合，初步掌握利用ＰＥＧ介
导动物细胞融合的实验技术。
二、实验原理
真核细胞通过介导和培养，两个或多个细胞合并成一个双核或多
核的细胞的过程称为细胞融合，通过此技术可以实现不同种类的细胞
的融合。基因型相同的细胞融合称为同核体（ｈｏｍｏｋａｒｙｏ
ｎ），基因型不同的细胞融合称为异核体（ｈｅｔｅｒｏｋａｒｙｏ
ｎ）
目前，诱导细胞融合的技术主要有三种：病毒，聚乙二醇（ＰＥ
Ｇ），电激。第一种方法是通过生物病毒的方式，诱导细胞与细胞之
间的融合。后两种方法通过化学物理的手段使得细胞膜的膜脂类分子
1
必威体育精装版资料整理推荐
的排列发生变化，去掉作用因素后，质膜分子的排列恢复原有的形态，
在恢复的过程中，可以诱导相接触的细胞发生融合。
ＰＥＧ介导的细胞融合，其融合效果受到以下几个因素的影响
①、ＰＥＧ的分子量与浓度
ＰＥＧ的分子量及其浓度越大，细胞融合效果越明显，但对细胞
的毒性也越大。本实验使用的ＰＥＧ分子量为４０００Ｄ，浓度为５
０％
②、ＰＥＧ的ｐｈ值
经验证，ＰＥＧ的浓度在８.０～８.２时，融合效果最好
③、ＰＥＧ处理时间
处理实验越长，融合效果越好，但对细胞的毒性也越大。故一般
将处理时间限制在１分钟以内。本实验不涉及后续的细胞培养，所以
处理时间可适当放宽至数分钟
④、融合时的温度
温度越高，细胞膜脂质的流动性越好，故在细胞可以承受的范围
内，适当的提高温度有利于细胞的融合
三、实验材料
新鲜鸡血
０.８５％生理盐水
ＧＫＮ液
2
必威体育精装版资料整理推荐
５０％ＰＥＧ液
四、实验步骤
取出鸡血悬液1ml，加入0.85%生理盐水，4ml，混匀。
1200r/min离心5分钟，移除上清液
加入4ml0.85%生理盐水，重悬细胞，1200r/min，离心5min，
3
移除上清
必威体育精装版资料整理推荐
加入4ml0.85%生理盐水，重悬细胞，1200r/min，离心10min，
移除上清
向离心沉淀中加入2mlGKN，使之成为10%的细胞悬液
4
必威体育精装版资料整理推荐
取血球悬液1ml，加入0.5ml50%的PEG液，混匀，开始计时
从计时开始，到盖上盖玻片在显微镜下观察为止。将处
理1、2、3、4分钟的细胞样品，显微镜下观察计数视野内
融合细胞的核数和视野内细胞的总核数，从而计算融合率
5
必威体育精装版资料整理推荐
计数视野内融合细胞的核数和视野内细胞的总核数，从而计算融
合率
视野内融合细胞的核数
融合率100%
文档评论（0）