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1.常用抗凝剂的种类及其应用
①乙二胺四乙酸(EDTA)盐:原理:可与血中钙离子形成可溶性螯合物,从而血液凝固。适用于血细胞计数。用量为EDTA-K-2HO1.5~2.2mg
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/ml血液。不适合:出凝血检查。对细胞形态影响小,但影响血小板。
②枸椽酸钠:原理:可与血中钙离子形成可溶性螯合物,从而血液凝固。出凝血(1:9)、血沉(1:4)、血液保养液(用法:109mmol/L)。
③肝素:原理:由肥大细胞和嗜碱性粒细胞产生,加强抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)灭活丝氨酸蛋白酶的作用,从而凝血酶形成。适用:血液流变学、
RBC脆性、血气分析、生化分析
④草酸钠原理:草酸钠可与血中钙离子生成草酸钙沉淀,从而血液凝固。适用:可用于凝血象检查。用法:常用0.1mol/L浓度,与血液按
1:9比例使用。
⑤双草酸盐抗凝剂:原理:草酸钾可使红细胞缩小,而草酸铵可使红细胞胀大,二者适量混合后,恰好不影响红细胞的形态和体积。适用于红细
胞比积、CBC、网织红细胞计数;但会影响白细胞形态、引起血小板,不适于血小板计数、白细胞分类计数。
2.良好的血涂片要求
良好的血片:厚薄适宜,头体尾分明
分布均匀,边缘整齐
两边留有一定的空隙
影响因素:血量(多——厚)
速度(快——厚)
角度(大——厚),一般30—45度
3.瑞氏染色的原理
瑞氏由酸性伊红和碱性亚甲蓝组成的复合。将一定的伊红和美蓝溶解在甲醇中,即为瑞氏染液。染液既有的吸附又有化学
亲和作用,各种细胞成分化学性质不同,对各种的亲和力也不一样,从而染不同染色。酸性环境中正电荷增多,易与伊红结合,染色偏红。
要求PH6.4—6.8为宜。(磷酸盐缓冲液)
4.Hb的测定原理
血液中除硫化血红蛋白(SHb)外的各种Hb(如氧合血红蛋白、碳氧血红蛋白、高铁血红蛋白(Hi)或其他衍生物)均可被高铁化钾氧化为高铁
血红蛋白,再和CN-结合生成稳定的棕红色复合物一化高铁血红蛋白,其在540nm处有一吸收峰,用分光光度计测定该处的吸光度,经换算即
可得到每升血液中的血红蛋白浓度,或通过的标准曲线查得血红蛋白浓度。
5.网织红细胞的分类
I型(丝球型),红细胞充满网状物,见于骨髓
II型(网型),红细胞网状物结构松散,见于骨髓
III型(破网型),红细胞网状结构稀少,呈不规则枝点状排列,见于外周
IV型(点粒型),红细胞内为分散的,细颗粒,短丝状网状物,见于外周血
6.牛鲍计数池原理
每块计数板由H形凹槽分为2个同样的计数池。计数板分为9个大方格,每个大格容积为0.1立方毫米。其央大方格用双线分成25个中
方格,位于正中及四角5个中方格是红细胞计数区域,每个中方格用单线划分为16个小方格。四角的4个大方格是白细胞计数区域,每个大方
格用单线划分为16个中方格。
7.利用MCV、MCH、MCHC对贫血进行分类
MCVMCHMCHC常见疾病
正细胞贫血NNNAA、急性失血、某些溶血性贫血
大细胞贫血↑↑N各种造血物质缺乏或利用不良的贫血
单纯小细胞↓↓N慢染、慢性肝肾疾病性贫血
小细胞低色素↓↓↓IDA、铁利用不良贫血、慢性失血性贫血
8.利用MCV、MCH、MCHC对贫血进行分类
MVCRDW分类意义
减低正常小细胞均一性轻度B-珠蛋白生成性贫血
减低升高
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