血液系统疾病流式细胞术分析.pptVIP

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血液病的流式细胞术分析华西医院临检血液室蒋能刚流式细胞术在血液病中的应用:01急性白血病免疫分型02淋巴细胞增殖性疾病免疫分型03骨髓增生异常综合征辅助诊断04微小残留白血病05ZAP70、P糖蛋白等预后指标检测06PNH(CD55、CD59)07细胞周期分析08CD34+细胞绝对计数09标本种类外周血骨髓胸腹水脑脊液淋巴结细针穿刺液活检组织标本要求

室温或2~4℃72h内01骨髓:急性白血病,MDS,MM02外周血:CD55、CD59,LGL03标本前处理:01.离心收集细胞(胸腹水、脑脊液)或制备细胞悬液(活检组织)02.了解标本中细胞组成(瑞氏染色、台盼蓝染色)细胞浓度调整免疫球蛋白:溶血-洗涤-标记-洗涤3胞膜抗原:标记-溶血-洗涤1胞浆抗原:标记-溶血-固定/破膜-标记-洗涤2一般处理步骤0102030405CD45SSC/FSCCD19、CD20设门方案CD3、CD5正常骨髓1淋巴2单核3粒细胞4CD455SSC6原始7嗜碱8嗜酸9Blastwindows10抗体设置

髓系一般标志:CD13、CD33、CD117、MPO02其他标记:CD14、CD64、CD401其他非髓系标记:CD2、CD5、CD7、CD56、CD1906CD71、GlyA03CD61、CD4104CD3605骨髓增生异常综合症(MDS)正确的结果解释有赖于良好的质量控制和标本细胞活性主要表现为粒系及单核系抗原表达异常BAB淋巴细胞κ、λ确定克隆性阶段性B细胞标记物:CD5、CD10、CD20、CD22、CD23、FMC7其他标记物:CD11c、CD25、CD103、CD38T/NK细胞抗原表达缺失和强度变化T淋巴细胞:CD2、CD3、CD4、CD5、CD7、CD8NK细胞:CD16、CD56benignMalignant结果分析分析的重点在于确定每一个细胞标记的存在与否以及表达的强弱(模式识别)。每个抗体在阳性细胞上的表达百分率并不重要。以残存正常细胞(如正常成熟淋巴细胞)作为分析参照物。结合细胞形态可事半功倍。AML-M1AML-M2AML-M3AML-M4/M5AML-M6非造血细胞非特异性染色(死亡细胞)ALL血小板附着于原始粒细胞所致CD61阳性拖尾巨核细胞白血病*

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