医学真菌生物膜研究进展.pptVIP

三.生物膜形成对真菌耐药性的影响形成生物膜后，真菌对氟康唑、伊曲康唑、咪康唑、酮康唑、两性霉素B、氟胞密啶等临床常用抗真菌药物和洗必泰等消毒剂的敏感性大大下降。特点：耐受的药物浓度超出游离细胞MIC的30-2000倍。耐药性在生物膜形成的早期就出现。随生物膜的成熟而增强。生物膜耐药的机制尚不明了，多数学者认为生物膜耐药是由多种因素决定的。在生物膜里，细胞的生长速度已经被认为是影响药物敏感性的一个重要调节因素。事实上，所有的抗生素对快速生长的细胞更有杀伤力。由于营养获得的限制，生物膜细胞处于缓慢生长状态，导致真菌的代谢降低，尤其是在生物膜的基层，因此表现出细胞对抗菌药物不敏感。但这显然不能完全解释生物膜抵抗超出正常MIC数十甚至上千倍浓度的耐药性。12生物膜细胞的低生长率生物膜确实有减缓药物渗透的作用。但在用念珠菌各菌种生物膜所做的实验中，加入药物3-6h后生物膜边缘的药物浓度已达到或超过MIC却不能杀死生物膜细胞。01包含白念珠菌和表皮葡萄球菌的混合生物膜中，药物渗透更缓慢。但是即使是这样，在生物膜边缘的药物浓度也常常超过MIC。02因此药物渗透不足并不是念珠菌生物膜主要的耐药机制。03药物渗透率流出泵在游离条件下，白念珠菌抵抗唑类药物的主要机制之一是由ABC运载体*和主要辅助因子#介导的药物流出泵，即cdr1、cdr2和mdr1。研究表明，在生物膜中两类流出泵基因均过表达。ATP-bindingcassettetransporters，CDR基因编码#majorfacilitator,MF，MDR基因编码缺乏流出泵的菌株所形成的早期生物膜对氟康唑的敏感性大幅增加。但在生物膜逐渐成熟后，缺乏药物流出泵的菌株同样耐药。因此，药物流出泵只在生物膜形成早期起作用。用罗丹明(Rh123)流出检测分析流出泵的功能也证实了这一点，即在早期阶段，生物膜与游离细胞的Rh123保留量有较大差别，而在后期(12h、48h)则无。321医学真菌生物膜研究进展

Biofilms:aNewPerspectiveonFungalInfection第二军医大学长征医院皮肤科廖万清21医学真菌学它是研究病原真菌和条件致病真菌对人类致病机制、诊断、治疗和预防的一门重要学科，属交叉、边缘学科。巨型丝状真菌（如香菇）真菌酵母丝状真菌念珠菌隐球菌球拟酵母菌微型丝状真菌（霉菌）真菌按其菌落形态分为特征：多细胞，有菌丝和孢子，基本形态是菌丝特征：在感染组织内寄生或在37℃高营养培养基培养时是酵母相，在体外腐生和27℃培养时呈菌丝相皮肤癣菌01真菌毒素中毒症：黄曲霉毒素,镰刀菌毒素。03浅部真菌病:皮肤及附属器官感染。02变态反应性疾病：多形性红斑，外源性变态反应性肺泡炎。04深部真菌病:局限性及系统性。真菌的致病方式各种原因导致真菌感染患者增加静脉插管抗生素的滥用糖尿病、AIDS病人群的增长免疫抑制剂的广泛使用体内人工植入物的推广免疫缺陷、免疫力低下等易感人群不断增多美国流行病学研究发现,1980至1982年与1992至1993年相比,念珠菌病发病率由2.6/100万/年上升至72.8/100万/年;隐球菌病由4.0/100万增至65.5/100万/年;曲霉病由8.4/100万/年增至12.4/100万/年。北京协和医院1953至1993年间尸检结果显示，后20年深部真菌感染率由1.5%增至5.6%。上述原因导致机会致病真菌感染的病例大幅增加，有许多感染反复难愈。其中有相当多的病例已经证实与真菌的生物膜形成有关。生物膜(biofilm)定义：是一种附着于活组织或无活力的组织表面、由其自身产生的细胞外多聚基质(extracellularmaxtrix,ECM)包裹的有结构的菌细胞群体，由ECM以及被其粘连的菌细胞构成。它是相对于游离状态菌细胞而言的另一种微生物的存在方式。它可以保护菌细胞，明显降低隐球菌等致病真菌对抗真菌药物的敏感性，甚至耐药。一.生物膜的形成和结构近年来已发现包括主要的人类致病真菌在内的多种真菌可以形成生物膜。1念珠菌可以形成生物膜且念珠菌形成的生物膜有对抗宿主防御机制的作用，并使得念珠菌对临床常规抗真菌药物明显耐药。Walsh等则最早报道了一个隐球菌生物膜形成的病例，该病人在心室心房分流术后心导管表面生长的微生物薄膜经培养确定为新生隐球菌，薄膜超微结构符合生物膜的结构特点，首次证实新生隐球菌也可以产生生物膜。Reynolds发现酿酒酵母生物膜的存在。2菌体与支撑物表面的粘附。形成微菌落。微菌落融合并