《医学微生物学实验》医学微生物学实验8-教学课件（非AI生成）.ppt

*******医学微生物学实验第8次病毒学实验1.病毒培养（录像）2.观察正常细胞与病变细胞的镜下特征（示教)3.病毒包涵体的镜下特征（示教）4.血凝试验（操作），血凝抑制试验（结果示教）病毒的基本形态病毒感染的致病机制1病毒感染对宿主细胞的直接作用杀细胞效应。Cytopathiceffect,CPE致细胞病变效应稳定状态感染。多核巨细胞，包涵体细胞凋亡基因整合与细胞转化2病毒感染的免疫病理作用抗体介导的免疫病理作用Ⅱ、Ⅲ型超敏反应细胞介导的免疫病理作用Ⅳ型超敏反应免疫抑制作用某些病毒感染可抑制免疫功能Phenomenaofviralproliferation*changesofcellCPE（细胞病变效应）(Cytopathiceffect)normalCPE(2)polykaryocyte(giant,multinucleate)（多核巨细胞）(3)inclusionbodies（包涵体）MeaslesgiantcellHCMVNegriBodyinneuroncell病毒包涵体的镜下特征（示教）呼吸道合胞病毒的包涵体观察正常细胞与病变细胞的镜下特征（示教)正常人胚肾细胞与病变细胞（接种腺病毒）血凝试验

血凝抑制试验血凝试验12435678PB2PB1RNPRNAM2M1NAHA分节段的（-）SSRNAPARNA多聚酶核糖核蛋白（RNP）血凝素(HA)神经氨酸酶（NA）血凝及血凝抑制现象示意图InfluenzavirusInfluenzavirusAnti-HAantibodyHemagglutinationInhibition原理：病毒表面有血凝素，能与鸡、豚鼠、人的红细胞表面的受体结合而发生凝集现象。HA＋RBC(受体）凝集（+)室温45min血凝试验应用：检测病毒的存在，滴定病毒的血凝效价，大致估计病毒颗粒的数量(1个血凝单位＝106病毒颗粒)加NS加1:5病毒加1％RBC0.2ml对倍稀释0.2ml0.2ml步骤RBCcontrol0.2ml0.2ml0.2ml0.2ml0.2ml0.2ml0.2ml0.2ml弃去123456781:401:801:1601:3201:6401:12801:201:10结果示意图-++++++++++++++效价？++++凝集显著，致密，成团块状，边缘不整；+++较疏松；分布面积较大，边缘不整；++凝集清楚可见，红细胞于窝底形成环状，四周有小凝集块；+红细胞于窝底形成小团，边缘不光滑，四周有小凝集块；－红细胞于窝底形成圆点状，边缘光滑整齐，四周液体清晰；以50％血球凝集（++）的最高病毒稀释度为试验的血凝滴度，即为1个血凝单位。血凝现象血凝抑制试验原理：若血清中出现特异性抗体与相应病毒结合，可以使病毒失去凝集红细胞的能力，从而抑制血凝现象的出现，此为血凝抑制。意义：辅助诊断一些病毒感染。恢复期比急性期血清抗体效价≥4倍有诊断意义?检测血凝抑制抗体(已知病毒+早,晚期血清)血凝抑制现象示意图InfluenzavirusInfluenzavirusAnti-HAantibodyHemagglutinationInhibition若血清中出现特异性抗体与相应病毒结合，可以使病毒失去凝集红细胞的能力，从而抑制血凝现象的出现，此为血凝抑制。12345678910N.S.0.20.20.20.20.20.20.20.20.20.41:5病人血清0.20.20.20.20.20.20.20.2--稀释度1:101:201:401:801:1601:3201:640血清对照病毒对照红细胞对照4个血凝单位病毒0.20.20.20.20.20.20.2-0.2-室温静置10min1％红细胞0.20.2