《医学微生物学实验》7.免疫学诊断，凝集反应，细胞免疫体外检测-教学课件（非AI生成）.ppt

医学免疫学实验第7次免疫学诊断

凝集反应，细胞免疫体外检测1.介绍免疫学诊断2.玻片凝集（操作，血型鉴定）3.白细胞的吞噬（操作）（吞噬细胞功能检测实验设计）4.E-花环试验、淋巴细胞转化试验、大、小吞噬细胞的吞噬现象（示教）免疫学诊断●抗原或抗体的检测●免疫细胞及其功能检测一、抗原或抗体的检测(一)检测的原理1.已知抗体测抗原（多用于定性,如细菌的鉴定和分型）2.已知抗原测抗体（多用于定量）(三)影响抗原抗体反应的因素1.温度：一般最适温度为37℃2.电解质：常用生理盐水3.pH：一般最适pH6-82.可见性3.可逆性1.特异性,LockandKeyConcept(二)抗原抗体反应的特点（比例合适）Equivalence–Latticeformation（四）常见抗原抗体反应的种类（4大经典反应）1.凝集反应AgglutinationTest概念：细菌、红细胞等颗粒性抗原与相应抗体结合后形成凝集团块称凝集反应。类型：★直接凝集反应★间接凝集反应★间接凝集抑制试验凝集反应原理图解（一）玻片凝集：ABO血型鉴定试管凝集：肥达试验同种异型抗原：Bloodtype：ABOABOABantigenantibodyAB－A,Banti-Banti-Aanti-A,－anti-BBloodtype凝集不凝集anti-Aanti-B原理操作标记抗A、抗B血清各1滴，分别滴于两侧采血各1滴，牙签混匀，观察凝集。凝集反应原理图解（二）凝集反应原理图解（三）妊娠试验二、淋巴细胞的测定（一）T细胞总数及亚群的测定（二）T细胞功能的测定1.淋巴细胞增殖试验形态学方法、3H-TdR掺入法等。2.细胞毒试验3.细胞因子测定1）T细胞花环形成试验(E-rosettetest)T细胞表面有绵羊红细胞受体，形成花环。计数200个淋巴细胞，结合3个SRBC或以上者的E花环阳性细胞数。T+TTTTcell玫瑰花环试验E-rosettetest2.T细胞增殖试验（淋巴细胞转化试验）T细胞在体外受到刺激物作用下，细胞代谢和形态相继发生变化，从而产生一系列增殖的变化，细胞变大，浆扩大，出现空泡、核仁明显，染色质疏松→转化为淋巴母细胞。计数200个淋巴细胞，算转化率。大、小吞噬细胞大吞噬细胞－单核巨噬细胞小吞噬细胞－中性粒细胞3.小吞噬细胞的吞噬作用标记加肝素1滴采血1滴加1滴菌液，37oC反应30min加底部沉淀细胞（10ul)，45o快速推片自然干燥加瑞氏染液反应1min，后加入等量蒸馏水反应5min细水流冲洗吸水纸印干后油镜检查混匀中性粒细胞嗜酸性粒细胞嗜碱性粒细胞单核细胞淋巴细胞