医学微生物学实验 病毒学实验-教学课件（非AI生成）.ppt

**************因为包膜有血凝素（HA），能凝聚多种动物红细胞（如鸡红细胞），对流感病毒的主要中和抗原可在鸡胚尿囊腔中增殖，是流感病毒的分离和增殖培养的主要方法在猴肾细胞中增殖，受染细胞表现为血凝现象**被胰蛋白酶消化成二个多肽：HA1、HA2HA1是与红细胞、宿主细胞结合的部位HA2具有膜融合作用，使HA与病毒包膜结合**参与病毒释放：NA可水解受染细胞表面的糖蛋白末端的N-乙酰神经氨酸，使病毒自细胞膜出芽释放促进病毒扩散：破坏细胞表面的粘液，有利于病毒扩散**抗原漂移（Antigendrift）：病毒抗原部分改变，原因是血凝素蛋白氨基酸序列由于基因突变而发生小改变，分子基本不变抗原转变（Antigenshift）：血凝素分子完全改变，因朱是基因发生重组。是导致流感暴发流行的原因******************4.血凝试验（操作），血凝抑制试验（结果示教）血凝试验

血凝抑制试验*正粘病毒（Orthomyxoviridae）*对人或某些动物细胞表面的粘蛋白有亲和性，有包膜，具有分节段RNA基因组的一类病毒。*只有流行性感冒病毒（influenzavirus）一个种，包括人流感病毒和动物流感病毒。*流感病毒（InfluenzaVirus）*1918~1919年期间的大流行全球有2000万人死于流感*生物学性状*1.形态与结构*球形或者椭圆形，80～120nm，有包膜*包膜上有放射状突起糖蛋白，主要是血凝素和神经氨酸酶分子**-ssRNA，分节段*甲、乙型8个节段*丙型7个节段*8Structuralproteins:GlycoproteinsHA(H1-H15)NA(N1-N9)M1,M28nucleocapsidsegmentsRNA,NP,PB1,PB2,PA*主要抗原结构*核糖核蛋白*血凝素*神经氨酸酶**HA的主要功能凝聚红细胞吸附宿主细胞主要中和抗原*HA抗原结构易发生变异血凝素（Hemagglutinin,HA）**能水解红细胞表面的神经氨分子*是弱中和抗原*功能参与病毒释放促进病毒扩散神经氨酸酶（Neuraminidase,NA）*2.复制周期*3.分型与变异*抗原变异机制*抗原性漂移（Antigendrift）*抗原性转变（Antigenshift）*4.培养特性*在鸡胚羊膜腔和尿囊腔中增殖*红细胞吸附试验（hemoadsorptiontest）*易感动物为雪貂*5.抵抗力*抵抗力较弱。*不耐热，56℃30分钟可灭活病毒。*室温下很快丧失传染性。**血凝试验12435678PB2PB1RNPRNAM2M1NAHA分节段的（-）SSRNAPARNA多聚酶核糖核蛋白（RNP）血凝素(HA)神经氨酸酶（NA）*HA和NA的功能是什么？**血凝素(HA)柱状，为三聚体，可与唾液酸受体结合凝集红细胞吸附宿主细胞主要中和抗原神经氨酸酶（NA）蘑菇状，四聚体可切割唾液酸修饰糖链参与病毒释放促进病毒扩散抗原性极其不稳定，易发生变异*血凝及血凝抑制现象示意图InfluenzavirusInfluenzavirusAnti-HAantibodyHemagglutinationInhibition原理：病毒表面有血凝素，能与鸡、豚鼠、人的红细胞表面的受体结合而发生凝集现象。HA＋RBC(受体）凝集（+)室温45min血凝试验应用：检测病毒的存在，滴定病毒的血凝效价，大致估计病毒颗粒的数量(1个血凝单位＝106病毒颗粒)*加NS加1:5病毒加1％RBC0.2ml对倍稀释0.2ml0.2ml步骤RBCcontrol0.2ml0.2ml0.2ml0.2ml0.2ml0.2ml0.2ml0.2ml弃去123456781:401:801:1601:320