生物学案：预习导航专题课题菊花的组织培养().docxVIP

学必求其心得，业必贵于专精

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预习导航

情境导入

课程目标

1。了解植物组织培养的基本原理。

2．会制备MS固体培养基。

3．掌握植物组织培养的基本技术。

4．能进行菊花的组织培养。

一、植物组织培养的基本过程

1．细胞分化：在植物的个体发育过程中，细胞在形态、结构和生理功能上出现稳定性差异的过程。

自主思考细胞分化是一种持久性的变化，它有什么生理意义？

提示:使多细胞生物体中细胞结构和功能趋向专门化，有利于提高各种生理功能的效率。

2．愈伤组织：由离体的植物器官、组织或细胞在一定的培养条件下经过细胞分裂过程形成的组织，叫愈伤组织，愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化、呈无定形状态的薄壁细胞。

3．脱分化：由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，又叫去分化.

4．再分化：脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官。

5．植物组织培养的过程可简单表示为

eq\x(\a\al（离体细胞、组织、器,官?又叫外植体?)）eq\o（――→，\s\up7（?脱分化?))eq\x(愈伤组织)eq\o（――→,\s\up7(?再分化?))eq\x（胚状体、丛芽等)eq\o(――→,\s\up7(?生长?））eq\x（新个体)

二、影响植物组织培养的因素

1．内部因素

不同的植物组织，培养的难易程度差别很大.同种植物材料的年龄、保存时间的长短等也会影响实验结果。菊花的组织培养，一般选择未开花植物的茎上部新萌生的侧枝作材料。

2．外部因素

(1)营养条件:常用的是MS培养基，其主要成分包括：大量元素,如N、P、K、Ca、Mg、S；微量元素，如Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、I、Co；有机物，如甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等。

(2）植物激素：植物激素中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性因素。植物激素的浓度、使用的先后顺序、用量的比例等都影响结果，如下表。

使用顺序

实验结果

先生长素，后细胞分裂素

有利于分裂但不分化

先细胞分裂素，后生长素

细胞既分裂也分化

同时使用

分化频率提高

生长素/细胞分裂素比值与结果

比值高时

促进根的分化,抑制芽的形成

比值低时

促进芽分化，抑制根形成

比值适中

促进愈伤组织生长

(3)环境因素：pH、温度、光等环境条件也能影响植物组织培养。

三、实验操作过程

1．制备MS固体培养基

（1）配制各种母液：将各种成分按配方比例配制成的浓缩液.使用时根据母液的浓缩倍数，计算用量，并加蒸馏水稀释。

（2）配制培养基:应加入的物质有琼脂、蔗糖、大量元素、微量元素、有机物和植物激素的母液，并用蒸馏水定容到1000毫升.在菊花组织培养中，可以不添加植物激素,原因是菊花茎段组织培养比较容易.

（3）灭菌:采取的灭菌方法是高压蒸汽灭菌.

2．外植体消毒

轻松判断（1）在此消毒过程中，强度越大越好。（）

（2）植物组织培养中无菌技术是操作成功的关键,针对培养基和外植体应进行灭菌操作.（)

提示：(1)×对外植体进行表面消毒时，既要考虑到药剂的消毒效果,又要考虑到植物的耐受力。

（2）×对培养基应进行高压蒸汽灭菌，对外植体应先后使用体积分数为70％的酒精及质量分数为0。1％的氯化汞予以消毒。

3．接种：用体积分数为70%的酒精消毒工作台，点燃酒精灯。注意所有接种工作都必须在酒精灯火焰旁进行，器械使用前后都要用火焰灼烧灭菌。接种过程中插入外植体时形态学上端朝上，每个锥形瓶接种6～8个外植体。

4．培养：放在无菌箱中进行，并定期进行消毒,保持适宜的温度和光照。

5．移栽:移栽前应先打开培养瓶的封口膜，让其在培养间生长几日，然后用流水清洗根部培养基。然后将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中生活一段时间，进行壮苗。最后进行露天栽培。