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家畜血吸虫病查治技术规范

1病原学诊断（粪便毛蚴孵化法）

1.1材料准备

1.1.1水：pH值6.8～7.2，无水虫和化学物质污染（包括氯气）的澄清水，否则需作

如下处理：有氯气的自来水应在盛器中存放8h以上。河水、池水、井水、雨水等混有水虫

的水加温至60℃，冷却后再用。或在5万ml水中加含30%有效氯的漂白粉0.35g，搅匀，

放置20h，待氯气逸尽；也可在放漂白粉后加入硫代硫酸钠0.2～0.4g脱氯，0.5h后再用。

对混浊的水，于每5万ml水中加明矾3～5g，充分搅拌，待水澄清后用。

1.1.2器材、试剂：竹筷、40～80目的铜筛滤杯、260目的尼龙筛兜、500ml量杯、粪

桶、放大镜、显微镜、吸管、载玻片、盖玻片、取暖炉、水温计、盆、水缸、水桶、剪刀、

闹钟、天平、300～500ml长颈平底烧瓶或200～250ml三角烧瓶、脱脂棉。

1.1.3送粪卡：包括村名、组名、饲养员或畜主姓名、畜别、畜名或畜号、性别、年

龄、有无孕、采粪日期。

1.1.4孵育室（箱）。室温低于20℃时需有保持20～25℃的环境条件，如有温箱或有

取暖设备的房间。

1.2操作方法

1.2.1采粪和送检：采粪季节宜于春秋两季，其次是夏季，不宜于冬季。采粪的时间

最好于清晨从家畜直肠中采取，或新排出的粪便。采粪量：牛、马属200g，猪100g，羊和

犬粪（农家）40g，每份粪样需附上填好的送粪卡，于采粪当天送到检验室。

1.2.2洗粪和孵化：将每头家畜的粪便分三份，每份粪量牛、马50g，猪20g，羊、犬

10g.然后根据实际情况选用下列一种方法进一步操作。

1.2.2.1尼龙兜淘洗孵化法：粪便在40目铜筛和量杯中用清水淘洗，细粪渣存于500ml

量杯中，待沉淀后去上清液，沉渣倒入尼龙兜用水冲淘洗，把尼龙兜中的粪渣装入三角烧瓶

或长颈平底烧瓶中加25℃左右清水，为便于观察毛蚴，在瓶颈下二分之一处加一块2～3cm

厚的脱脂棉，再加清水至瓶口。

1.2.2.2塑料杯顶管法：置粪于铜筛量杯中加水充分淘洗，弃去粪筛量杯中的上层水，

倒去三分之二，加25℃清水，盖上中间有孔的塑料盖再加满25℃清水，再将盛满水的试管

口塞一块2～3cm厚的脱脂棉，倒插入塑料盖孔中。

1.2.3孵育：上述两种方法装好的三角烧瓶、长颈烧瓶或塑料杯放于20～25℃的箱（室）

中，在一定的光照（日光或灯光）条件下进行孵育。从孵育开始到1、3、5h后各观察一次，

尾蚴多数在水面下2mm范围内呈直线运动。发现血吸虫毛蚴即判定为阳性。血吸虫毛蚴肉眼

观察为针尖大小、灰白色、梭形、折光强和水中其他小虫不同之处是在近水面作水平或斜向

直线运动，当用肉眼观察难与水中的其他小虫相区别时，可用滴管将毛蚴吸出，置显微镜下

可见毛蚴前部宽，前段中间有个顶突，两侧对称，后渐窄，周身有纤毛则可判为血吸虫毛蚴。

在一个样品中有1～5个毛蚴为＋，6～10个毛蚴为＋＋，11～20个毛蚴为＋＋＋，21个毛

蚴以上为＋＋＋＋。以判断、统计血吸虫病感染的强度。

2家畜血吸虫病血清学诊断（间接血凝试验）

2.1材料准备

2.1.1器材：V型微孔有机玻璃血凝板（孔底角90°），25μl定量移液器，滴管，可

插针头的滴管或1～2ml注射器，12号针头。

2.1.2生理盐水、蒸馏水。

2.1.3诊断液和阴、阳性血清：按说明书处理和保藏。

2.2操作方法

2.2.1用滴管滴4滴生理盐水于血凝板左边第1孔内，用同一滴管加入被检血清1滴，

使血清成5倍稀释。

2.2.2用带12号针头滴管或移液管在左边第2、3孔中各加生理盐水1滴（25μl）。

2.2.3用移液器将第1孔血清混匀，混匀方法是反复吸吹三次，然后吸25μl已混匀

液加入右边邻孔中，此孔血清成1：10稀释。

2.2.4用移液器和7.2.2.3一样混匀第2孔血清，吸取25μl加入第3孔中，此时该

孔血清成1：20稀释。

2.2.5用移液器和7.2.2.