DB43T 1064-2015 饲料中喹烯酮的测定高效液相色谱法.docxVIP

ICS65.120B46

DB43

湖南省地方标准

DB43/T1064—2015

饲料中喹烯酮的测定高效液相色谱法

DeterminationofQuinocetoneinFeeds

Highperformanceliquidchromatographicmethod

2015-07-20发布2015-09-20实施

湖南省质量技术监督局发布

I

DB43/T1064—2015

目次

前言 Ⅱ

1范围 1

2规范性引用文件 1

3原理 1

4试剂与材料 1

5仪器与设备 1

6采样与试样制备 2

7测定步骤 2

8结果计算 2

9灵敏度、准确度和精密度 3

附录A（资料性附录）喹烯酮高效液相色谱图 4

II

DB43/T1064—2015

前言

本标准按GB/T1.1—2009的规则编制。

本标准某些内容可能涉及专利，本标准发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由湖南省畜牧水产局提出并归口。

本标准起草单位：湖南省兽药饲料监察所、湖南省畜禽水产品质量检验检测中心。

本标准主要起草人：欧阳龙、匡光伟、肖安东、徐丽枚、谭美英、陈启友、隆雪明、邓昉、魏群、张俊波、周玉洁、江燕、邓均红。

1

DB43/T1064—2015

饲料中喹烯酮的测定高效液相色谱法

1范围

本标准规定了饲料中喹烯酮的高效液相色谱测定的方法。

本标准适用于我省配合饲料、浓缩饲料、添加剂预混合饲料中喹烯酮的测定。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件；凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T14699.1饲料采样

GB/T20195动物饲料试样的制备

3原理

采用乙腈提取试样中的喹烯酮，固相萃取小柱净化，高效液相色谱-紫外法测定，外标法定量。

4试剂与材料

除另有说明外，所用试剂均为分析纯，实验用水应符合GB/T6682一级水的规定。

4.1甲醇色谱纯。

4.2乙腈色谱纯。

4.3乙腈。

4.4固相萃取柱：中性氧化铝，1000mg/6mL。

4.5喹烯酮标准品，含量≥98.0%。

4.6喹烯酮标准储备液：称取喹烯酮标准品25mg（精确到0.01mg）于25mL的容量瓶中，用乙腈溶解并定容至刻度，即为1.0mg/mL的喹烯酮标准储备液。4℃以下避光保存，有效期为三个月。

4.7喹烯酮标准工作液：精密量取适量喹烯酮标准储备液，用乙腈稀释成0.2μg/mL、0.5μg/mL、1.0μg/mL、5.0μg/mL、10μg/mL、50μg/mL的标准工作液，现配现用。

4.8微孔滤膜：0.22μm，有机膜。

5仪器与设备

5.1高效液相色谱仪：配置二极管阵列检测器或紫外检测器。

5.2分析天平：感量0.00001g和0.001g。

5.3离心机：转速≥10000r/min，带有50mL离心管。

5.4超声波清洗机。

DB43/T1064—2015

2

6采样与试样制备

6.1采样按GB/T14699.1的规定执行。

6.2试样制备按GB/T20195的规定执行。

7测定步骤

7.1提取

称取试样2.5g（精确到0.001g）,置于100mL具塞锥形瓶中,准确加入25.0mL乙腈，超声

提取10min，静置，液体转入50mL离心管中10000r/min离心5min，上清液备用。

7.2净化

上清液过中性氧化铝柱，弃除初滤液，收集滤液过微孔滤膜，待测。

7.3高效液相色谱参数

色谱柱：C18柱(250mm×4.6mm，5μm)，或相当者。流动相：甲醇:水（V:V=60:40）。

流速：1.0mL/min。进样量：10μL。

检测波长：314nm。

7.4试样测定

取试样溶液和相应的标准工作液进样，以组分的保留时间定性，以色谱峰面积积分值做单点或多点校准，外标法定量。标准工作液和试样溶液中喹烯酮的响应值均应在仪器检测的线性范围内。喹烯酮高效液相色谱图参见附录A，喹烯酮标准工作液色谱图参见附录A中图A.1，配合饲料中添加喹烯酮标准物质色谱图参见附录A中图A.2