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单克隆抗体的制备及特点
第一篇:单克隆抗体的制备及特点
单克隆抗体
一、单克性抗体的制备
1、免疫动物是用目的抗原免疫小鼠,使小鼠产生效应B淋巴细胞
的过程。
2、将准备好的骨髓瘤细胞与效应B淋巴细胞按一定比例混合,并
加入促融合剂聚乙二醇或灭活的病毒。在聚乙二醇或灭活的病毒作用
下,各种效应B淋巴细胞可与骨髓瘤细胞发生融合,形成杂交瘤细胞。
3、选择性培养选择性培养的目的是筛杂交瘤细胞。在选择性培
养基上未融合的骨髓瘤细胞、未融合的淋巴细胞,但其本身不能在体
外长期存活也逐渐死亡。只有融合的杂交瘤细胞才能在选择性培养基
存活,杂交瘤细胞既能无限增殖,又能分泌特异性抗体
4、杂交瘤细胞的克隆化培养和抗体阳性检测。选择性培养基中生
长的杂交瘤细胞,只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞,因
此,必须进行筛选和克隆化,筛选出能产生所需单克隆抗体的阳性杂
交瘤细胞。
5、单克隆抗体的大量制备单克隆抗体的大量制备重要采用动物
体内培养法和体外培养法。
(1)体内培养法;用注射器抽取腹水,从中可获得大量单克隆抗体。
(2)体外培养法将杂交瘤细胞置于培养瓶中进行培养。从培养液中获取
所需要的单克隆抗体。
二、单克性抗体的特点
特异性强、灵敏度高、能大量制备
三、杂交瘤细胞的特点
杂交瘤细胞既能无限增殖,又能分泌特异性抗体
四、单克隆抗体制备过程中有三个筛选过程
1、从脾脏中筛选出多种效应B细胞。
2、在特定的培养基中筛选杂交瘤细胞
3、进行克隆化培养和抗体阳性检测,筛选出能产生特定抗体并能
无限增殖的杂交瘤细胞。
五、单克隆抗体应用的基本原理是:抗原——抗体的的特异性结
合。
六、单克隆抗体的主要应用
1、作为诊断试剂:单克隆抗体最广泛的应用就是作为诊断试剂。
由于单克隆抗体纯度高、特异强,能准确地识别抗原物质的细微差别,
并能与一定抗原特异性结合。
2、用于治疗疾病和运载药物。把抗癌细胞的单克隆抗体放射性同
位素、化学药物或细胞毒素结合制成生物导弹。利用抗原——抗体的
的特异性结合,借助单克隆抗体的导向作用,能将药物定向带到癌细
胞所在部位,在原位杀死癌细胞,不损伤正常细胞、药剂量少、疗效
高、毒副作用小。
第二篇:单克隆抗体的制备
单克隆抗体的制备
摘要:单克隆抗体技术是现代生命科学研究的重要工具,在基因和蛋
白质的结构和功能研究方面有着不可或缺的作用。近年来,随着分子生
物学技术的发展,出现了嵌合单克隆抗体和由转基因小鼠、噬菌体展示
技术、核糖体展示技术及共价展示技术所产生的单克隆抗体。这些技
术将有效解决单克隆抗体的鼠源性等问题。下面主要讲述制备单抗的
实验过程。
关键词:抗体,单克隆,肿瘤,细胞融合,淋巴细胞
现代生物技术制药工业始于1971年,现已创造出35个重要治疗
药物,全球大约有2500多家公司,主要产品有重组蛋白质药品、重组
疫苗和诊断、治疗用的单克隆机体三大类。我国自80年代在采用现代
生物技术改造传统生物技术制药产业方面已取得初步成果。但我国生
物技术诊断试剂、酶工程、动植物细胞工程医药产品、现代生物技术
支撑技术、后处理技术和制剂技术等方面与国外还存在差距。
1.国外现代生物技术产业发展的现状
自1971年Cetus公司成立至今,现代生物技术制药工业已走完了
二十五年的路程,创造出35个重要的治疗药物,目前已在治疗癌症、
多发性硬化症、贫血、发育不良,糖尿病、肝炎、心力衰竭、血友病、
囊性纤维变性和一些罕见的遗传性疾病中取得良好效果。在医药工业
中,传统生物技术(包括近代生物技术)已为人类提供了许多重要药
品,在保障人类生命健康和推动社会进步中发挥了巨大作用;现代生
物技术以其特有的高新技术又为人类提供了传统生物技术难以获得的
极微量的珍贵药品。由于这一系列现代生物技术新型药物的出现,使
过去无法治疗的疑难疾病得到了治疗。同时,应用现代生物技术DNA
重组,细胞融合以及细胞大规模培养等现代生物技术发展和提高传统
生物技术的生产水平,为抗生素、氨基酸、维生素以及基体激素等药
品的生产,构建了高产新菌株,创造新工艺,提高生产能力,降低生
产成本,促进生产发展。
2.我国现代生物技术医药产业发展的现状
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