神经系统囊虫病的诊断和治疗.ppt

9免疫学诊断9.1抗体检测9.1.1总IgG存在时间较为持久，在非活动期也可检测到，治疗前后没有明显差异。9.1.2特异性IgG4检出与体内囊尾蚴的存活有一致性，感染消除后特异性IgG抗体可持续存在，但特异的IgG4会迅速降低或消失。因此，检出特异IgG4在囊尾蚴病诊断和疗效考核中具有很好的应用价值。第63页,共93页，星期六，2024年，5月9.1.3IgG4的优势A研究认为脑囊虫病CSF特异性IgG4抗体主要产生于鞘膜内，只有当血脑屏障功能障碍后才仅有少量来自于周围血液。囊虫感染后可引起血清及CSF特异性IgG4升高。B避免交叉反应交叉反应是蠕虫病免疫诊断中的常见难题。蠕虫抗原富含多糖、糖蛋白或糖脂，其中磷酸胆碱(Pc)和多糖抗原复合物(GAC)抗原是免疫诊断中引起交叉反应的主要因素。第64页,共93页，星期六，2024年，5月IgG分IgG1、IgG2、IgG3、IgG4四个亚类，它们的结构、功能及参与对复合抗原应答的程度存在着不同，IgGl、IgG2、IgG3抗体分子可变区具有结合磷酸胆碱(Pc)和多糖抗原复合物(GAC)抗原决定簇的能力，IgG4铰链区短小而缺乏柔韧性，其可变区不识别GAC和PC抗原，因此，检测蠕虫特异性总IgG容易出现有交叉反应，IgG4检测则可避免GAC和PC抗原引起的非特异性反应，具有较高特异性。第65页,共93页，星期六，2024年，5月9.1.4特异性抗体检测的抗原变化9.1.4.1粗抗原抗原与多种寄生虫抗原有交叉反应，检测的抗体特异性不强，已渐被纯化抗原替代。9.1.4.2纯化抗原离子交换层析纯化囊尾蚴抗原片断所得纯化抗原，其诊断特异性较高，但其诊断结果受纯化过程的影响，缺乏统一的评价标准，并且不能批量生产，限制其进一步的推广应用。第66页,共93页，星期六，2024年，5月9.1.3.3重组抗原利用基因工程技术制备的重组抗原稳定、价廉、结果重复性好。以重组抗原为诊断抗原建立ELISA诊断方法，检测血清和脑脊液的敏感性分别为94.7％和100％，特异性分别为93.8％和100％；但重组抗原的前提是抗原的序列已知或编码该抗原的基因序列已知，目前，囊尾蚴基因库和肽库中的已知序列还远小能满足人们的要求。第67页,共93页，星期六，2024年，5月9.2循环抗原（CAg）检测:9.2.1CAg是活囊尾蚴排泄至宿主体液中具有抗原特性的物质，只有在囊尾蚴存活时才可以检测得到。在机体内出现早，容易早期诊断。早诊断早治疗对于提高治愈率非常重要，且在感染早期脑CT或MR的表现多不典型。9.2.2患者经过治疗，体内的虫体逐渐死亡、分解或钙化后，CAg逐渐降低或消失。因此检测CAg还可用于临床治疗效果的考核。第68页,共93页，星期六，2024年，5月9.2.3目前作为研究试验和临床检验利用的多克隆抗体，主要以抗原免疫哺乳动物，从兔血清中提取IsG抗体用于囊虫病的诊断。9.2.4脑脊液CAg检测有助于脑囊虫病的诊断，而血清CAg检测则有助于疗效考核。第69页,共93页，星期六，2024年，5月9.3免疫复合物(CIC)检测：由于抗原、抗体及其免疫复合物(CIC)三者统一体地存在，若样本不经处理，检测到的则是游离型CAg和Cab，并非代表总体抗原、抗体情况。临床上配合CAg和CAb进行CIC测定，将有助于提高脑囊尾蚴病的诊断率。第70页,共93页，星期六，2024年，5月9.4检测标本：9.4.1血液囊虫病免疫学检测的常用标本，用于检测抗体、抗原和CIC。9.4.2脑脊液CSF具有较血液更为特异的抗原、抗体检测优势，在临床上既可与血液同步检测，亦可作为添加检测样本，以利于更准确地诊断囊虫病。第71页,共93页，星期六，2024年，5月9.4.3新的选择：尿液唾液特点：无创、简便、快速第72页,共93页，星期六，2024年，5月9.5常用免疫学检测方法：9.5.1酶联免疫吸附试验(ELISA)ELISA是20世纪70年代建立的一种安全、简便的免疫学诊断方法，广泛用于囊虫病的诊断的流行病学调查。9.5.2单克隆抗体酶联免疫吸附试验(McAb-ELISA)McAb-ELISA