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电针对阿尔茨海默病大鼠海马PKC和

GDNF表达的影响

作者：张海燕刘忠锦冯化杰等

来源：《中国当代医药》2013年第07期

摘要[]目的探讨电针对阿尔茨海默病（alzheimer′sdisease，AD）大鼠海马蛋白激酶C

（proteinkinaseC，PKC）和胶质细胞源性神经营养因子（glialcellline-derivedneurotrophic

factor，GDNF）表达的影响。方法Morris水迷宫筛选40只健康Wistar大鼠随机分4组。正常

组不给予任何处理，其余3组大鼠采用链脲霉素（STZ）所致AD模型，造模后模型组不治

疗，电针组针刺双肾俞、双太溪、双足三里、百会、大椎等穴位治疗，西药组氢溴酸加兰他敏

灌胃，疗程为4周。免疫组化法检测PKC和GDNF的表达。结果免疫组化显示模型组大鼠

PKC和GDNF表达减少，电针组和西药组大鼠表达增加，差异有统计学意义（P0.05）。结

论电针可能通过对AD大鼠海马PKC和GDNF表达增强的影响，对神经元起到保护作用。

关键词[]电针；阿尔茨海默病大鼠；蛋白激酶C；胶质细胞源性神经营养因子

中图[分类号]R-33[文献标识码]A[文章编号]1674-4721（2013）03（a）-0020-02

阿尔茨海默病是老年人常见的神经系统退行性疾病，主要病理特征为细胞外老年斑中β淀

粉样蛋白的沉积、细胞内由成对的过度磷酸化的Tau蛋白组成的神经原纤维缠结[1]，其病因

及发病机制尚不清楚，多种治疗方法目前正在探索中[2]。神经营养因子（NTFs）与神经系统

疾病密切关系。而胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）是神经营养因子家庭中的一名新成

员。关于电针治疗AD大鼠海马GDNF表达的方面比较少，本研究主要观察电针对AD大鼠海

马PKC和GDNF表达的影响。

材料与1方法

动物1.1选择及分组

清洁级健康Wistar大鼠45只，雄性，体重200～250g，白求恩医大实验动物中心提供，

合格证号2010002，经水迷宫测试筛选40只，随机分为4组：正常组、模型组、西药组和电

针组，正常组常规饮水和饲料。其余3组大鼠均采用链脲霉素（STZ）所致AD模型，模型组

造模后不治疗。参照华兴邦等[3]的大鼠穴位图谱，电针组针刺双肾俞（第二腰椎棘突下左、

右侧旁开7mm）、双足三里（腓骨小头下约5mm处）、百会（顶骨正中）、大椎（第七颈

椎与第一胸椎间）[4]等穴治疗，用0.250.25mm×华佗牌无菌毫针针刺，连接KWD-808全能

脉冲电疗仪，电压为2V，频率为30Hz，，强度以肢体局部轻微颤动为适。西药组采用氢溴

酸加兰他敏灌胃0.5～1.0mg/（kgd·），治疗4周。

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主要试剂和仪器1.2

氢溴酸加兰他敏，链脲霉素STZ（注射前将STZ溶于0.9%氯化钠溶液）。PKC免疫组化

检测试剂盒（博士德生物工程有限公司），GDNF免疫组化检测试剂盒（博士德生物工程有限

公司），脑立体定位仪，水迷宫，Hans电针仪，Olympus显微镜。

模型复制1.3

水合氯醛10%4mL/kg麻醉大鼠，在头部做正中矢状切口，坐标为脑表面下3.5mm，前囟

1.5mm，矢状缝左右旁开1.5mm。在每侧侧脑室注射10%链脲霉素10μL，创口缝合。3d后

重复注射一次。

各组大鼠标本的制备1.4

大鼠治疗4周后，麻醉后暴露出心脏，左心室插入灌注针头，快速灌入无菌生理盐水冲洗

组织内血液，同时剪开右心耳，冲洗至肝脏变白，然后灌注4%多聚甲醛，当大鼠尾巴、四肢

僵硬时断头取脑，分离海马[5]。一侧海马装入冻存管，一侧置于4%多聚甲醛中，浸泡固定，

取海马标本，脱水包埋切片。

免疫组1.5织化学染色大鼠海马PKC和GDNF

PKC、GDNF免疫反应阳性产物为棕黄色点状颗粒，主要分布在胞浆。采集免疫组化染色

图像，用Imagepro-Plus