紫外可见分光光度法PPT课件 (1).ppt

(2)仪器类型一般分为四类：单光束——双光束——双波长——多道型——(3)分光光度计的校正当光度计使用一段时间后其波长和吸光度将出现漂移，因此需要对其进行校正。波长标度校正：使用镨-钕玻璃（可见光区）和钬玻璃（紫外光区）进行校正。因为二者均有其各自的特征吸收峰。吸光度标度校正：采用K2CrO4标准液校正（在25oC时）。§3.5分析方法一.分析条件选择1)仪器测量条件由于光源不稳定性、读数不准等会带来的误差。当分析高浓度的样品时，误差更大。由L-B定律：微分后得：将上两式相比，并将dT和dc分别换为?T和?c，得当相对误差?c/c最小时，求得T=0.368或A=0.434。即当A=0.434时，吸光度读数误差最小！通常可通过调节溶液浓度或改变光程b来控制A的读数在0.15~1.00范围内。2)反应条件选择显色剂的选择原则：使配合物吸收系数?最大、选择性好、组成恒定、配合物稳定、显色剂吸收波长与配合物吸收波长相差大等。显色剂用量：配位数与显色剂用量有关；在形成逐级配合物，其用量更要严格控制。溶液酸度：配位数和水解等与pH有关。显色时间、温度、放置时间等。3)参比液选择溶剂参比：试样组成简单、共存组份少（基体干扰少）、显色剂不吸收时，直接采用溶剂（多为蒸馏水）为参比；试剂参比：当显色剂或其它试剂在测定波长处有吸收时，采用试剂作参比（不加待测物）；试样参比：如试样基体在测定波长处有吸收，但不与显色剂反应时，可以试样作参比（不能加显色剂）。4)干扰消除来源:共存物的吸收与被测元素的吸收峰重叠消除:控制酸度：配合物稳定性与pH有关，可以通过控制酸度提高反应选择性，副反应减少，而主反应进行完全。如在0.5MH2SO4介质中，双硫腙与Hg2+生成稳定有色配合物，而与Pb2+、Cu2+、Ni2+、Cd2+等离子生成的有色物不稳定。选择掩蔽剂——选择合适的测量波长——干扰物分离——导数光谱及双波长技术——THANKYOUSUCCESS**可编辑紫外可见分光光度法紫外可见分光光度法可编辑紫外可见分光光度法可编辑§3.1概述定义：紫外-可见分光光度法是基于分子内价电子（对200~800nm光谱区辐射）发生跃迁产生的吸收光谱进行分析的一种光学分析方法。特点：(1)灵敏度高;(2)准确度好;(3)仪器结构简单，操作简便快速。发展简史：1729年：波格（Bouguer）发现物质对光的吸收与吸光物质的厚度有关；1760年：其学生朗伯（Lambert）发现当一束平行单色光通过吸光物质后，光的吸收程度与溶液液层厚度成正比；1852年：Beer发现当一束平行的单色光通过吸光物质后，光的吸收程度与吸光物质微粒的数目（溶液的浓度）成正比，提出了朗伯-比尔定律；1870年：法国人杜包斯克（JDuboscq)制造了“杜包斯克比色计”，沿用了70多年；20世纪以来：多元络合物、高灵敏显色剂、计算机的应用，使之得到蓬勃发展。另一方面：1833年希儒斯特(Brewester)观察并记录过吸收光谱，后来密勒(Miller)又系统研究了紫外区的光谱，并指出物质的吸收情况与基团、原子和分子的性质有关。以后哈脱莱(Hartley)改进了仪器。接着贝利(Baly)又发现与吸收光谱相似的有机物，它们的结构亦相类似，认为由此可以鉴定分子结构。进入20世纪以来，紫外-可见分光光度法得到广泛的应用。§3.2紫外-可见吸收光谱(1)分子吸收光谱的产生分子外层电子—吸收外来外来辐射—产生电子能级跃迁—分子吸收光谱。在分子中，除了电子相对于原子核的运动外，还有核间相对位移引起的振动和转动。据量子力学理论，分子的振-转跃迁也是量子化的。因此，分子的能量变化?E为各种形式能量变化的总和：其中?Ee最大：1-20eV;?Ev次之：0.05-1eV;?Er最小：?0.05eV可见，电子能级间隔比振动能级和转动能级间隔大1~2个数量级，在发生电子能级跃迁时，同时伴有振-转能级的跃迁，形成所谓的带状光谱。根据吸收电磁波范围的不同，可将