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紫杉醇-抗HER2MAb偶联物体外抗肿瘤活性的研究

张玲;郭晓雷;张秋影;佟青玥;曲成刚;施维;韩智星;张桂荣

【摘要】目的研究紫杉醇(Paclitaxel,TAX)与抗HER2(Humanepidermal

growthfactorreceptor2,表皮生长因子受体2)单克隆抗体(Mab)偶联物(TAX-抗

HER2MAb)体外抗肿瘤作用.方法实验细胞为MCF-7乳癌细胞,MTT法检测细胞

增殖抑制作用,进行统计学分析;FCM检测细胞凋亡率;琼脂糖凝胶电泳分析凋亡细

胞基因组DNA;Western-blot检测细胞HER2蛋白表达水平.结果在相同药物浓度

下偶联物对肿瘤细胞抑制率明显高于TAX,具有统计学意义(P0.05);半数抑制率药

物浓度(IC50)相差20%,具有统计学意义(P0.05);FCM和琼脂糖凝胶电泳DNA检

测分析,偶联物作用的细胞凋亡效果明显高于TAX,Western-blot检测出偶联物作

用的肿瘤细胞HER2蛋白表达量明显降低.结论TAX-抗HER2MAb偶联物体外抗

肿瘤作用明显高于TAX.

【期刊名称】《中国实验诊断学》

【年(卷),期】2010(014)011

【总页数】4页(P1732-1735)

【关键词】紫杉醇;表皮生长因子受体2(HER2);免疫偶联物

【作者】张玲;郭晓雷;张秋影;佟青玥;曲成刚;施维;韩智星;张桂荣

【作者单位】吉林大学第一医院,检验科,吉林,长春130021;南航吉林分公司航卫室,

吉林,长春130031;吉林大学白求恩医学院生化教研室,吉林,长春130021;吉林大学

白求恩医学院生化教研室,吉林,长春130021;吉林大学白求恩医学院生化教研室,吉

林,长春130021;吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室,吉林,长春130012;吉林

大学分子酶学工程教育部重点实验室,吉林,长春130012;吉林大学白求恩医学院生

化教研室,吉林,长春130021

【正文语种】中文

【中图分类】R979.1

利用单克隆抗体对肿瘤细胞表面抗原的选择特异性,对抗癌药物进行主动靶向设计

研究,可提高抗癌药物对肿瘤细胞的选择性,实现靶向治疗,降低对正常器官的毒性。

1958年,Mathe首次将抗鼠白细胞免疫球蛋白与甲氨蝶偶联用于靶向治疗,随后出

现了各种抗癌药物与各种抗体的偶联物。目前,抗体偶联的靶向抗癌药物研究正在

成为生物技术药物领域的新热点,并具有良好的前景。

本课题组采用活化酯法将抗癌化学药紫杉醇与抗HER2单克隆抗体偶联,合成了免

疫偶联物(TAX-抗HER2MAb)靶向抗癌药,本文以乳腺癌MCF-7细胞为药物作用

对象,研究免疫偶联物TAX-抗HER2MAb的体外抗肿瘤活性,为乳腺癌的靶向治疗

提供了实验基础。

1材料与方法

1.1材料

TAX-抗HER2MAb偶联物为本课题组先期合成;人乳癌细胞株MCF-7由吉林大学

生命科学院酶工程实验室提供;HER-2抗原Biovision;HRP-羊抗鼠IgG华特生生物

技术有限公司;BSASigma产品;MTTGenview产品;RPMI-1640美国Hyclone产

品;FCS杭州四季青生物工程材料公司;V-FITC细胞凋亡检测试剂盒Annexin;DYY-

Ⅲ稳压稳流高压电泳仪(北京六一仪器厂);TanonGLS-2010凝胶成像(上海天

能);Horaues型二氧化碳培养箱(日本SANYO公司);ELTIE型流式细胞仪(美国

Coulter公司);BHZ型光学显微镜(日本OLYMPUS公司);转膜系统(Bio-Rad)。

1.2方法

1.2.1MTT法检测TAX-抗HER2MAb偶联物对肿瘤细胞增殖的抑制作用实验设

空白对照组(正常培养的MCF-7乳癌细胞悬液)、试剂对照组(加DMSO)、TAX药

物组及偶联物药物组(设5个药物浓度:1.28×10-2nmol/L、6.4×10-2nmol/L、