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间日疟原虫乳酸脱氢酶的表达、纯化及单克隆抗体
的制备的开题报告
一、研究背景与意义
间日疟是一种由间日疟原虫(Plasmodiumvivax)引起的寄生虫病,
它主要分布在热带和亚热带地区,对全球范围的人类健康造成了很大的
影响。间日疟原虫的病原学研究一直是寻找抗疟药物和疫苗的重点领域
之一。乳酸脱氢酶(LDH)作为间日疟原虫中一种重要的代谢酶,在间日
疟原虫的诊断、病原学研究和药物研发等方面都具有重要的意义。
二、研究目的
本研究旨在表达、纯化间日疟原虫LDH,并制备其单克隆抗体,为
该病原体的病原学研究和药物研发提供支持。
三、研究计划
1.间日疟原虫LDH的基因克隆和表达:
通过PCR扩增间日疟原虫LDH基因,将其克隆到表达载体中,将载
体转染至大肠杆菌(E.coli)中进行表达。
2.间日疟原虫LDH的蛋白纯化:
利用亲和层析技术将表达LDH的大肠杆菌分离纯化LDH蛋白,再通
过凝胶过滤层析等技术进一步提高LDH的纯度。
3.单克隆抗体的制备:
对LDH蛋白进行免疫,获得抗原抗体,再将抗体与肿瘤细胞融合形
成杂交瘤,筛选出具有特异性的单克隆抗体。
4.抗体的检验和应用:
对制备的单克隆抗体进行免疫印迹、ELISA等检验方法的验证,验
证其对LDH的特异性识别和应用。
四、预期结果
本研究预期能够表达、纯化间日疟原虫LDH,并制备出具有特异性
的单克隆抗体,为该病原体LDH的病原学研究和药物研发提供支持。
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