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·324·中国免疫学杂志2022年第38卷
doi：10.3969/j.issn.1000-484X.2022.03.012
牡荆素调控miR-219a-5p表达对LPS诱导的支气管上皮细胞凋亡和炎症
反应的影响
王伟平王君邓飞①赵彩杰韩景新②（唐山职业技术学院护理系，唐山063300）
中图分类号R562.2文献标志码A文章编号1000-484X（2022）03-0324-04
慢性气道炎症性疾病是多种细胞因子引起的（1000μg/ml，4mg/kg），对照组注入等量生理盐水，
慢性呼吸系统疾病，支气管上皮细胞在维持气道微并立即注入空气0.5ml，牡荆素低、中、高剂量组先
环境稳态中起重要作用，支气管上皮细胞损伤与感用LPS滴注，损伤模型成功建立后分别滴注1.5、3、
6mg/kg牡荆素。给药结束后正常饲养小鼠24h，麻
染性疾病的发生密切相关［1-2］。牡荆素是一种天然
黄酮类化合物，可通过抗神经凋亡、调节炎症因子醉处死小鼠后取肺组织，石蜡切片。
［3］1.2.2原位缺口末端标记法检测小鼠肺组织细胞
对神经系统起保护作用。牡荆素还可通过减少心
肌细胞凋亡，降低炎症因子水平保护心肌炎症细胞凋亡情况取各组小鼠石蜡切片，按试剂盒说明书
［4］操作，细胞核中有棕褐色颗粒者为阳性细胞，记录
免受CVB3病毒诱导的损伤。但牡荆素对支气管
3个高倍镜视野下的凋亡细胞数，凋亡指数（%）=
上皮细胞凋亡和炎症反应的影响及机制尚不清楚。
脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）可诱导机体炎症反凋亡细胞数/3个高倍镜视野下细胞总数×100%。
应，因此，本研究采用LPS刺激支气管上皮细胞，观1.2.3免疫组化法检测小鼠肺组织IL-6、IL-13、
TNF-α表达取各组小鼠肺组织石蜡切片（5μm），
察牡荆素对LPS诱导的支气管上皮细胞凋亡和炎症
反应的影响及机制，为慢性气道炎症性疾病治疗提脱蜡水化，抗原修复，3%过氧化氢灭活内源性过氧
供新思路和新靶点。化物酶，避光20min，PPS洗2次，5min/次；5%胎牛
1材料与方法血清封闭，分别加入兔抗人IL-6、IL-13、TNF-α一抗，
37℃孵育2h，PPS洗2次，5min/次；加入山羊抗兔
1.1材料人支气管上皮细胞系16HBE购自上海二抗，PPS洗2次，5min/次，DAB染色，苏木素复染
2min，脱水，透明，封片，荧光显微镜观察拍照。
酶研生物科技有限公司；RPMI1640培养基购自美
国Gibco公司；LPS、牡荆素（纯度≥95%）购自美国1.2.4细胞培养与分组人支气管上皮细胞系
Sigma公司；TUNEL检测试剂盒购自北京中山生物16HBE复苏后接种于RPMI1640培养基（含10%胎
技术有限公司；凋亡检测试剂盒、RIPA蛋白裂解液牛血清），37℃、5%CO培养，2~3d传代1次，取对数
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