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血流感染的实验室诊断1血流感染概述2自动化血培养系统3标本采集和运送4阳性报警后处理方法5如何判断是否污染一、血流感染概述血流感染(bloodstreaminfections,BSI)是指各种病原微生物侵入血循环,释放毒素和代谢产物,并诱导细胞因子释放,对机体所有脏器造成损害,严重者可导致休克、多脏器衰竭、弥散性血管内凝血,甚至死亡,是一种严重的全身感染性疾病。(二)血流感染的类型01菌血症(bacteremia):细菌侵入血流,尚未大量繁殖且未引发临床症状,往往是一过性的。02败血症(septicemia):细菌进入血液大量繁殖,分泌毒素或代谢产物,产生严重的临床症状。03脓毒败血症(pyemia):细菌进入血液大量繁殖,分泌毒素或代谢产物,产生严重的临床症状,常伴有多发性脓肿或败血性休克。04毒血症(toxemia):细菌毒素或代谢产物进入血液引起的临床病症。送检率低送检量(瓶/日)床位中国大陆三甲医院20~501000中国香港玛丽医院2001400中国台湾台大医院3002000美国JohnHopinks300~4001039(三)血培养的现状不正确采样01污染问题皮肤定植菌群是血培养污染的最常见细菌。02阳性检出率低03检验周期长04全自动血培养系统我院使用的是BacT/ALERT3D全自动细菌、分枝杆菌培养系统工作原理:细菌在培养基中代谢基质时产生CO2,并水解成H+,H+透过瓶底滤过膜,瓶底乳胶感应器颜色由墨绿色变成黄色。仪器培养孔底的光电探测器测量反射光变化并按相应公式计算。判读公式:加速度法速率法起始阈值法标本采集和运送(一)标本采集采集时间尽可能在抗菌药物使用前;对已经使用抗菌药物的病人,最好在下次用药前采集;寒战和发热初起时采血可提高培养阳性率,心内膜炎(持续性菌血症)例外;怀疑血流感染时应尽早采血,不要强调体温超过39℃才抽血,而错过时机。寒战后体温高峰前细菌含量最高。血液细菌含量随着体温从最高峰逐渐下降而越来越少。血液采样的最佳时间是在寒战后和发热高峰前,此时阳性检出率最高。采血量成人采血量为5~10ml/瓶,分别采取需氧瓶和厌氧瓶,双部位抽血。儿童采血量为3~5ml/瓶,采取儿童瓶。(二)标本运送采血后的血培养瓶应立即送检,不得超过2h。不能放入冰箱或冷冻,有些苛养菌如肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟菌等遇冷很容易死亡。如在培养之前不得不放置一段时间,应置于室温。阳性报警后处理方法0102观察培养曲线涂片、转种血平板革兰染色镜检报告危急值血培养阳性报警后,如何处理?重新涂片,作瑞氏染色以培养曲线作初步判断是否假阳性,次日观察血平板上是否生长若革兰染色镜检未发现细菌,怎么办?阳性曲线阴性曲线*
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