肺泡Ⅱ型上皮细胞SPA、SPB、SPC mRNA表达的影响.pdfVIP

利多卡因对高氧暴露早产大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞SPA、SPB、

SPCmRNA表达的影响

丁小芳;钟礼立;张兵;李嘉

【摘要】目的观察利多卡因(Lido)对高氧所致的早产大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(AEC

Ⅱ)功能的影响.方法原代培养的早产大鼠AECⅡ随机分为4组:空气(Air)组、高氧

(HO)组、Air+Lido组、HO+Lido组.HO、HO+Lido组在更换培养液后按

5L/min通入95%O2-5%CO2的高纯混合气,10min后密封.Air+Lido、

HO+Lido组在更换培养液时加人20μg/ml的Lido,各组均置于37℃、5%CO2

培养箱中培养24h,收集各组细胞,运用Real-Time.PCR检测肺表面活性物质蛋白

(SP)A、SPB、SPCmRNA的表达.结果HO组SPA、SPB、SPCmRNA表达低于

Air组(P0.01);Air+Lido组SPA、SPB、SPCmRNA表达高于Air组

(P0.01);HO+Lido组SPA、SPB、SPCmRNA高于HO组(P0.01),但低于Air

组(P0.01).结论高氧可导致早产大鼠AECⅡSPA、SPB、SPCmRNA表达下

调,Lido能逆转上述改变.Lido对高氧所致早产鼠AECⅡ损伤有一定的保护作用.

【期刊名称】《山东医药》

【年(卷),期】2011(051)020

【总页数】3页(P39-41)

【关键词】利多卡因;肺泡Ⅱ型上皮细胞;肺泡表面活性物质相关蛋白类;早产;大鼠

【作者】丁小芳;钟礼立;张兵;李嘉

【作者单位】湖南省人民医院,长沙,410005;湖南省人民医院,长沙,410005;湖南省

人民医院,长沙,410005;湖南省人民医院,长沙,410005

【正文语种】中文

【中图分类】R722.6

早产儿对缺氧耐受性差，使用氧疗的机会多，然而，氧毒性对早产儿可产生严重后

遗症，如肺损伤和视网膜病等。肺表面活性物质蛋白(SP)合成和分泌的多少是反映

肺泡Ⅱ型上皮细胞(AECⅡ)功能的一项重要指标。SP缺乏或功能不足易发生肺损

伤。有报道称吸入高浓度氧可引起SP不足或活性降低，与早产儿高氧肺损伤的发

生密切相关［1］，给予外源性SP可以预防慢性肺损伤(CLD)的发生。利多卡因

(Lido)可作用于中性粒细胞参与炎症反应的各个环节，减轻多种原因引起的急性肺

损伤(ALI)［2］，但其对早产儿高氧所致的肺损伤是否亦具有保护作用目前尚少见

报道。2007年12月～2008年11月进行本研究，拟观察Lido对高氧环境下早

产大鼠AECⅡ功能的影响。

1材料与方法

1.1实验动物SD大鼠，体质量200～250g，购自湖南农业大学实验动物部。

1.2主要试剂小鼠抗Cytokeratin单克隆抗体及荧光显色剂(武汉博士德生物公

司);95%O2-5%CO2高纯混合气购自湖南莲湖氧气厂;Lido(常州康普药业有限公司，

0710065);TRIzol总RNA提取试剂盒、逆转录试剂盒(长沙赢润生物工程公

司);SYBGREENPCRMasterMix(美国ABI公司)。

1.3主要仪器Elx-800酶联免疫检测仪，美国Bio-Tek公司产品;CYS1数字式测氧

仪，上海嘉定学联仪表厂;7500型定量PCR仪，美国ABI公司;电子分析天平，美

国Sartorius公司。

1.4早产鼠AECⅡ原代培养SD大鼠雌雄按3∶1同笼过夜，次日晨检查雌鼠阴道

阴栓计为孕0d，孕期满20d(足月为22d)时行剖宫产术，取出胎鼠作为早产鼠。

剪开胎鼠胸腔，取出肺组织，参照并改进文献［3］方法分离纯化AECⅡ，将细胞

以5×105/L接种于50ml培养瓶中，培养48h后用免疫组化及电镜鉴定，结果为

细胞数量多、纯度高符合本实验要求。

1.5实验分组早产鼠AECⅡ经贴壁纯化后随机分为4组(每组5瓶):空气(Air)组、

高氧(HO)组、Air+Lido组、HO+Lido组。HO、HO+Lido组在更换培养液后按

5L/min通入95