整合素αvβ3对MDA-MB-231BO乳腺癌细胞AKT信号通路的调控.pdfVIP

整合素αvβ3对MDA-MB-231BO乳腺癌细胞AKT信号通

路的调控

彭远远;王捷;夏冰;杨传红;冼江

【摘要】旨在探究整合素αvβ3的单克隆抗体LM609在BSP不同表达水平的乳

腺癌细胞中对AKT(蛋白激酶B)信号通路的影响.利用免疫细胞化学法检测BSP不

同表达水平的乳腺癌细胞中整合素αvβ3的表达量.BSP基因沉默乳腺癌MDA-

MB-231BO细胞,Westernblotting在蛋白水平检测磷酸化AKT的表达,MTT试

验和细胞划痕试验分别检测细胞增殖、迁移能力的变化.结果显示,与231BO-

Scrambled细胞相比,231BO-BSP27细胞中BSP蛋白水平明显降低,抑制率达到

(59.43±1.71)％；LM609分别处理两株细胞后,与对照组231BO-Scrambled细胞

相比,BSP基因沉默组21BO-BSP27细胞中AKT磷酸化水平下调明显,为

(33.78±1.51)％(P＜0.01)；231BO-BSP27细胞和对照组231BO-Scrambled中

细胞的增殖和迁移能力均有不同程度的下降(P＜0.05).LM609能够抑制胞内整合

素αvβ3功能的表达,进而对AKT信号通路进行调控,并影响细胞增殖和迁移的发生.

【期刊名称】《生物技术通报》

【年(卷),期】2012(000)003

【总页数】5页(P191-195)

【关键词】整合素αvβ3;LM609;乳腺癌细胞;AKT信号通路

【作者】彭远远;王捷;夏冰;杨传红;冼江

【作者单位】广州军区广州总医院医学实验科,广州510010;华南理工大学生物科

学与工程学院,广州510006;广州军区广州总医院医学实验科,广州510010;广州军

区广州总医院医学实验科,广州510010;广州军区广州总医院医学实验科,广州

510010;广州军区广州总医院医学实验科,广州510010

【正文语种】中文

骨唾液酸蛋白（BSP）是1994年由Bellahcence首次在发生骨转移的人乳腺癌细

胞中发现并阐明[1]。BSP是SIBLINGs（smallintegrin-bindingligandN-

linkedglycoproteins）家族中重要成员，在肿瘤黏附、增殖[2]、侵袭[3]、基质

降解、免疫反应[4]、血管生成和转移中发挥重要生物学作用，是治疗乳腺癌骨转

移可能的药物靶点。整合素αvβ3通过识别配体分子BSP中的RGD序列与其结合，

从而介导相关信号通路，参与肿瘤的血管生成、侵袭转移等生理和病理过程。必威体育精装版

研究证明，整合素αvβ3能对AKT丝氨酸473位点磷酸化导致AKT激活，进而增

强下游因子VEGF、NF-KB等相关因子的表达，具有抗凋亡作用并能促进肿瘤血

管生成[5]。本试验室已经证明，沉默BSP能够抑制PI3K-AKT信号转导通路，并

抑制下游分子caspase-3、VEGF和cyclinD1的活性[6]。但BSP是否通过受体整

合素αvβ3作用调控AKT信号通路，进而影响细胞的增殖和迁移的发生，尚不清

楚。本研究旨在探讨αvβ3是否介导了BSP对AKT信号通路的活化，为揭示BSP

调控信号通路进而促进肿瘤转移的机制提供试验依据。

BSP基因沉默乳腺癌细胞株MDA-MB-231BOBSP27、导入无关质粒pSilencer-

scrambled的对照乳腺癌细胞株MDA-MB-231BO-Scrambled，分别简称为

231BO-BSP27和231BO-Scrambled，由广州军区广州总医院医学实验科保存

[7]，两株细胞同属于乳腺癌亲骨转移细胞系MDA-MB-231BO。尼康YSK-088

荧光显微镜，整合素αvβ3鼠抗单克隆抗体LM609，购于Millipore公司。免疫

组化Elivisionplus试剂盒（鼠/兔），AEC显色液，AEC水溶