DB34T 1434-2011 抗虫和耐除草剂玉米Bt176及其衍生品种实时荧光PCR检测方法　　.pdfVIP

ICS65.020.20

B22DB34

安徽省地方标准

DB34/T1434—2011

抗虫和耐除草剂玉米Bt176及其衍生品种

实时荧光PCR检测方法

Real-timePCRmethodforinsect-resistantandherbicide-tolerantmaizeBt176andits

derivates

2011-05-11发布2011-06-11实施

安徽省质量技术监督局发布

DB34/T1434—2011

前言

本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。

本标准由安徽省技术监督局提出。

本标准由安徽省质量技术监督局归口。

本标准起草单位：安徽省农业科学院水稻研究所和安徽省标准化研究院。

本标准主要起草人：汪秀峰、杨剑波、李莉、陆徐忠、马卉、张士胜、倪大虎、宋丰顺、陈萍、倪

金龙、杨亚春、张毅。

I

DB34/T1434—2011

抗虫和耐除草剂玉米Bt176及其衍生品种实时荧光PCR检测方法

1范围

本标准规定了转基因抗虫和耐除草剂玉米Bt176的实时荧光PCR转化体特异性检测方法。

本标准适用于转基因抗虫和耐除草剂玉米Bt176及其衍生品种，以及相关制品中Bt176成分的实

时荧光PCR定性检测方法。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版版本(包括所有的修改单)适用于本文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

NY/T672转基因植物及其产品检测通用要求和定义

NY/T673转基因植物及其产品检测抽样

NY/T674转基因植物及其产品检测DNA提取和纯化

农业部869号公告-8-2007抗虫和耐除草剂玉米BT176及其衍生品种定性PCR方法

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

3.1

基因zSSIIbzSSIIbgene

玉米醇溶蛋白基因。

3.2

Bt176转化体特异性序列event-specificsequenceofBt176

外源插入载体3’端与玉米基因组的连接区序列，包括bar基因部分序列和玉米基因组部分序列。

3.3

实时荧光PCRReal-timePCR

通过对PCR扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量的分析。

3.4

阈值threshold

1

DB34/T1434—2011

实时荧光PCR中以PCR反应的前15个循环的荧光信号作为荧光本底信号，荧光阈值的缺省设置

是3～15个循环的荧光信号的标准偏差的10倍。

3.5

Ct值cyclethreshold

每个反应管内的荧光信号到达设定的阈值时所经历的循环数。

4原理

实时荧光PCR技术，是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监控整个PCR

过程。

TaqMan荧光PCR技术是以TaqMan荧光探针为基础，该