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基于荧光定量PCR的羊绒、牦牛绒混合物定量检测方法
费静;孙世元;王涛;魏晓英;张回飞
【摘要】物种相近、理化性质相同的特种动物纤维在外观形态上十分相似,难以鉴
别,常见的有羊绒/羊毛,驼绒/羊驼绒等.然而,羊绒中的紫羊绒,与细度相近的牦牛绒
混合在一起,更难辨别,是检测中的难点,也是目前市场掺假的主要原因.目前,特种动
物纤维的检测主要借助显微镜或者电镜观察形态而鉴别,依赖检验人员的经验进行
判断,主观性较强.本研究从毛发自带的物种特异性的DNA出发,借助荧光定量PCR
技术,建立羊绒和牦牛绒的定量标准曲线,实现这两种混合物的定量检测.
【期刊名称】《现代纺织技术》
【年(卷),期】2019(027)005
【总页数】5页(P34-38)
【关键词】羊绒;牦牛绒;荧光定量PCR;DNA定量检测
【作者】费静;孙世元;王涛;魏晓英;张回飞
【作者单位】上海海关工业品与原材料检测技术中心,上海200135;嘉兴市产品质
量检验检测院,浙江嘉兴314000;上海海关工业品与原材料检测技术中心,上海
200135;嘉兴市产品质量检验检测院,浙江嘉兴314000;上海海关工业品与原材料
检测技术中心,上海200135
【正文语种】中文
【中图分类】TS137
随着人们对绿色生活方式的倡导,传统的特种动物纤维产业又蓬勃发展起来。羊毛、
羊绒、驼绒、牦牛绒纤维等均为秋冬季最受欢迎的保暖纺织材料。
羊绒产自山羊,是山羊外表皮特有的一层薄薄地掩在粗毛根部的细绒,仅占动物纤维
总产量的0.2%,羊绒以纤细、滑糯,并兼以柔软、保暖等特点著称,被称为纤维界的
“钻石”、“软黄金”,稀缺性和珍贵性导致了羊绒的价格高高在上,远高于一般的
羊毛产品。中国是最大的羊绒输出国,产量约占全世界产量的四分之三,出口创汇可
观。山羊绒产业是西部经济的助推器,也是牧民增收的主要来源,对西部经济有着重
要意义。
牦牛是一种能在高原高寒的恶劣环境下生存的哺乳动物,是牛科动物唯一有纺织利
用价值的成员。牦牛被称为高原之舟,生长于青藏高原及其毗邻地区的高寒地带。
牦牛厚厚长长的毛层下聚集着细密的绒毛,这些绒毛为牦牛在高寒的天气状况下生
存提供了可能。中国是世界上牦牛数目最多的国家,约占全世界总数的90%。牦牛
绒很细,直径18~20μm,长度为35~50mm,有不规则弯曲,鳞片呈环状紧密抱合,
光泽柔和,弹性强,手感滑糯[1]。
绝大多数牦牛绒呈棕色。牦牛绒与紫山羊绒在外表形态上很相似,鳞片的密度、厚
度也相近,纤维边缘整齐,平滑,且两者在显微镜下均存在色素团,给鉴别工作带来了困
难。一些不法分子利用这一相似性,将牦牛绒充作紫山羊绒坑害消费者,从中牟利。
中国现行的标准GB/T16988—2013《特种动物纤维与绵羊毛混合物含量的测定》
对牦牛绒的描述:牦牛绒纤维鳞片张角较小,鳞片密度为100~130个/mm,毛色为
黑色、棕褐色。而在一般的光学显微镜下,鳞片并不是很清晰,检测起来费时费力。
电镜法成本高,且制样比较烦琐。由于本身带有色素,紫山羊和牦牛绒通常会被制成
深色的织物,这就进一步给检测鉴别工作增加了难度[3-4]。图1是显微镜下的紫山
羊绒和牦牛绒。
图1显微镜下的紫山羊绒和牦牛绒
DNA检测近年来在食品、动植物检疫、司法和环境监测中得到广泛应用。荧光定
量PCR技术,是一种加入了荧光基团的体外模拟DNA扩增的技术(PCR)。
在PCR反应体系中加入荧光基团,荧光信号的积累在一定程度上反映了整个反应的
进度,每增加一条DNA新链就能捕捉到一个荧光分子信号,同步化了荧光信号和
PCR产物的积累,最后通过曲线对未知模板进行定性或定量分析[5-6]。
本研究提供了一种基于荧光定量PCR技术的山羊绒、牦牛绒纤维混合物的定量鉴
别方法。针对山羊、牦牛的线粒体DNA序列设计物种特异的引物和探针,利用实
时荧光PCR技术,建立起山羊绒牦牛绒标准混合物与它们的DNA之间的对应关系。
未知样品的检测可以通过对其中山羊源成分、牦牛源成分进行定量检测,通过对照
标准曲线求得各自的含量。
1试验
1.1试验材料
用于制作标准曲线的紫山羊绒购自内蒙古,牦牛绒购自专门生产牦牛绒产品的
Shokay
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