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单克隆抗体的制备

摘要:单克隆抗体技术是现代生命科学研究的重要工具,在基因和蛋白质的结构和功能研究

方面有着不可或缺的作用。近年来,随着分子生物学技术的发展,出现了嵌合单克隆

抗体和由转基因小鼠、噬菌体展示技术、核糖体展示技术及共价展示技术所产生的

单克隆抗体。这些技术将有效解决单克隆抗体的鼠源性等问题。下面主要讲述制备

单抗的实验过程。

关键词：抗体，单克隆，肿瘤，细胞融合，淋巴细胞

现代生物技术制药工业始于1971年，现已创造出35个重要治疗药物，全

球大约有2500多家公司，主要产品有重组蛋白质药品、重组疫苗和诊断、治疗

用的单克隆机体三大类。我国自80年代在采用现代生物技术改造传统生物技术

制药产业方面已取得初步成果。但我国生物技术诊断试剂、酶工程、动植物细

胞工程医药产品、现代生物技术支撑技术、后处理技术和制剂技术等方面与国

外还存在差距。

1．国外现代生物技术产业发展的现状

自1971年Cetus公司成立至今，现代生物技术制药工业已走完了二十五年

的路程，创造出35个重要的治疗药物，目前已在治疗癌症、多发性硬化症、贫

血、发育不良，糖尿病、肝炎、心力衰竭、血友病、囊性纤维变性和一些罕见

的遗传性疾病中取得良好效果。在医药工业中，传统生物技术（包括近代生物

技术）已为人类提供了许多重要药品，在保障人类生命健康和推动社会进步中

发挥了巨大作用；现代生物技术以其特有的高新技术又为人类提供了传统生物

技术难以获得的极微量的珍贵药品。由于这一系列现代生物技术新型药物的出

现，使过去无法治疗的疑难疾病得到了治疗。同时，应用现代生物技术DNA重

组，细胞融合以及细胞大规模培养等现代生物技术发展和提高传统生物技术的

生产水平，为抗生素、氨基酸、维生素以及基体激素等药品的生产，构建了高

产新菌株，创造新工艺，提高生产能力，降低生产成本，促进生产发展。

2．我国现代生物技术医药产业发展的现状

现代生物技术医药产业化进程：我国自80年代开始进行现代生物技术药品

的研究和开发，虽然起步较晚，基础较差，但一开始就受到党和国家的高度重

视，并列为“863”计划和国家重点攻关项目的主要内容，经过十多年的努力，

特别是近五年来，现代生物技术医药产业有了突破性的进展，到1998年7月底

我国已有十四种现代生物技术药品和疫苗投入生产，据初步统计，1997年的工

业总产值约20亿（包括采用现代生物技术改造传统生物技术后新增加的产值在

内）。

目前我国己有近200多个现代生物技术制药企业，其中约30家生产企业已

具有不同规模的生产能力，陆续投入生产。因此，可以说我国现代生物技术制

药产业化已经开始。

3.单克隆抗体

3.1单克隆抗体的概念

抗体是由B淋巴细胞分化形成的浆细胞合成、分泌的。每一个B淋巴细

胞在成熟的过程中通过随机重排只产生识别一个抗原的抗原受体基因。动物

脾脏有上百万种不同的B淋巴细胞系，重排后具有不同基因不同的B淋巴细

胞合成不同的抗体。当机体受抗原刺激时，抗原分子上的许多决定簇分别激

活各个具有不同基因的B细胞。被激活的B细胞分裂增殖形成效应B细胞

（浆细胞）和记忆B细胞，大量的浆细胞克隆合成和分泌大量的抗体分子分

布到血液、体液中。如果能选出一个制造一种专一抗体的浆细胞进行培养，

就可得到由单细胞经分裂增殖而形成细胞群，即单克隆。单克隆细胞将合成

针对一种抗原决定簇的抗体，称为单克隆抗体。

3.1单克隆抗体的主要特点

1)由于来于单克隆细胞，所分泌的抗体分子在结构上高度均一，甚至在氨

基酸序列及空间构型上均相同；

2）由于抗体识别的是抗体分子上单一抗原位区，且所有抗体分子均相同，

由此，单克隆抗体具有高度特异性；

3）产生该抗体的为一无性细胞系，且可长期传代并保存，为此可持续稳定

的生产同一性质的抗体。

3.2单克隆抗体的应用

作为亲合层析的配体:单克隆抗体能与其相应的抗原特异性结合，因而

能够从复杂系统中识别出单个成分。只要得到针对某一成分的单克隆抗体，

利用它作为配体，固定在层析柱上，通过亲合层析，即可从复杂的混和物中

分离、纯化这一特定成分。如用抗人绒毛膜促性腺激素(hCG)亲合层析柱，

就可从孕妇尿中提取到纯的hCG。与其它提取方法(沉淀法、高效疏水色谱法

等)相比，具有简便、快速、经济、