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胚胎期斑马鱼丙泊酚暴露可下调髓鞘碱性蛋白的表达

刘川;林春水;郭培培;张昕;朱晓勤

【摘要】目的探讨胚胎期斑马鱼丙泊酚暴露下调髓鞘碱性蛋白(MBP)表达及相关

机制.方法受精后6～48h(6～48hpf)的斑马鱼胚胎,随机分为对照组、二甲基亚

砜(DMSO)组、20μg/mL丙泊酚组和30μg/mL丙泊酚组,采用浸泡方式给药.于

48hpf、72hpf收集幼鱼.通过荧光定量RT-qPCR法检测MBPmRNA和少突胶

质细胞转录因子1(Olig1)、Olig2、性别决定区盒基因(Sox10)mRNA表达(n=80

条/组);Westernblot法检测MBP蛋白表达(n=80条/组);TUNEL、免疫荧光法检

测少突胶质细胞凋亡(n=6条/组).结果与对照组相比,20μg/mL、30μg/mL丙泊酚

暴露两组MBPmRNA、MBP蛋白于72hpf均明显下调(P0.05),另外30μg/mL

组较20μg/mL组MBP蛋白表达显著减少(P0.05);20μg/mL、30μg/mL两组转

录因子Olig1、Olig2、Sox10mRNA表达于48hpf、72hpf明显下调(P0.05),

少突胶质细胞凋亡于72hpf显著增多(P0.05).结论胚胎期斑马鱼丙泊酚暴露可

能通过诱导少突胶质细胞凋亡增多及抑制转录因子Olig1、Olig2、Sox10,从而下

调MBP表达.

【期刊名称】《南方医科大学学报》

【年(卷),期】2018(038)009

【总页数】6页(P1115-1120)

【关键词】丙泊酚;鞘磷脂蛋白;少突胶质细胞;凋亡;斑马鱼胚胎

【作者】刘川;林春水;郭培培;张昕;朱晓勤

【作者单位】南方医科大学南方医院麻醉科,广东广州510515;南方医科大学南方

医院麻醉科,广东广州510515;南方医科大学南方医院麻醉科,广东广州510515;

南方医科大学南方医院麻醉科,广东广州510515;南方医科大学南方医院麻醉科,广

东广州510515

【正文语种】中文

全麻药对发育中大脑的潜在风险近年来引起广泛关注，静脉麻醉药丙泊酚以起效快、

苏醒迅速、不良反应小等优势，被广泛用于麻醉的诱导和维持。少突胶质细胞是神

经胶质细胞中的一种，主要围绕神经元的轴突形成髓鞘，确保动作电位的准确传递

［1］、支持轴突的存活［2］以及在神经元轴突损伤后引导轴突再生［3］。髓鞘

碱性蛋白（MBP）是少突胶质细胞特异性表达蛋白［4］，占髓鞘蛋白的1/3。研

究表明，丙泊酚可下调新生SD乳鼠MBP蛋白表达［5］，我们前期研究利用胚

胎期斑马鱼丙泊酚暴露模型［6］，发现丙泊酚可下调72hpf幼鱼后脑、脊髓处

MBP转录水平及蛋白表达，然而有关丙泊酚下调MBP表达机制尚不明确，近期

研究显示丙泊酚可诱导孕期胎猴、新生猕猴少突胶质细胞凋亡增多［7］，另外研

究［8-9］发现少突胶质细胞转录因子表达异常可导致MBP表达减少，在此之上，

我们认为丙泊酚下调MBP表达可能与少突胶质细胞凋亡增多及相关转录因子表达

异常有关，因此本研究通过斑马鱼模型进一步探究丙泊酚下调MBP蛋白表达的作

用机制。

1材料和方法

1.1材料

丙泊酚原液（sigma，批号D126608）、兔抗斑马鱼MBP多克隆抗体（genetex，

批号GTX54239）、兔抗GAPDH多克隆抗体（genetex，批号GTX100118）、

兔抗-GFP抗体（abcam，批号ab290）、TUNEL试剂盒（Roche，批号

12156792910）、qPCR引物由上海生工股份有限公司合成、逆转录试剂盒量

（TaKaRa）、RNA提取试剂盒（TaKaRa）、RT-PCR试剂盒（TaKaRa）。PCR

仪（LightCycle480，Roche瑞士）；荧光电动显微镜（Olympuscorporation

日本）。

1.2方法