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ING4和FP248基因检测在白血病和消化道肿瘤中的临床意义

学生李继刚导师许文荣江苏大学基础医学与医学技术学院2008年06月06日一研究背景1.ING4基因(1)ING4基因的生物学特性及功能p13.31ING4，8个外显子诱导P21表达上调ING4的变异与肿瘤发生的关系01添加标题神经母细胞瘤细胞株02添加标题肺癌细胞株03添加标题乳腺癌细胞株04添加标题结直肠癌细胞株05添加标题ING4变异06添加标题白血病？07添加标题健康人心、脑、肝、肺、肾组织添加标题ING4-V1:30%－35%添加标题ING4-V2:42%－50%添加标题成人及胎儿心、脑、肝、肺、肾添加标题肿瘤组织添加标题白血病？？？添加标题消化道肿瘤？？？添加标题本研究检测白血病患者骨髓添加标题中主要剪接方式添加标题单击此处添加小标题ING4在多种肿瘤组织中表达下调单击此处添加小标题ING4单击此处添加小标题神经胶质瘤单击此处添加小标题头颈部鳞状细胞癌单击此处添加小标题肺癌单击此处添加小标题消化道肿瘤白血病2.原癌基因FP2488q24.3，FP248，3个外显子8与肝癌有关FP248蛋白质，208aa其他肿瘤？？？二研究内容和研究意义研究ING4和FP248在多种肿瘤细胞株中的表达水平ING4和FP248基因在白血病中的临床意义ING4和FP248基因在消化道肿瘤中的临床意义021.研究目的建立检测ING4和FP248基因的realtimeRT-PCR和nestedRT-PCR方法，并分析ING4和FP248基因对白血病和消化道肿瘤的诊断意义。研究内容建立采用RT-PCR和real-timeRT-PCR检测ING4和FP248mRNA表达的方法01研究意义为白血病和消化道肿瘤的诊断和预后提供新的更为便捷的方法和指标，也为这些疾病的基因治疗提供了两个靶基因。注:A：ING4标准品扩增曲线；B：ING4标准品扩增产物融解曲线，C：ING4标准曲线.图1.ING4标准品三方法建立1.成功建立了采用real-timeRT-PCR检测ING4和FP248基因表达的方法注：A：FP248标准品扩增曲线；B：FP248标准品扩增产物融解曲线C：FP248标准曲线.图2.FP248标准品注：A：GAPDH标准品扩增产物融解曲线；B：GAPDH标准品扩增曲线；C：GAPDH标准曲线。图3.GAPDH标准品表1.real-timeRT-PCR关键参数2.成功建立了采用Western印迹技术检测ING4蛋白质表达的方法；3.成功建立了采用免疫组织化学技术检测组织中ING4蛋白质表达的方法。1实验设计2肿瘤细胞株中ING4和FP248基因表达检测3肿瘤细胞6检测FP248mRNA5检测ING4mRNA4抽提总RNA注：A.细胞株中ING4基因及部分标准品扩增曲线标准品浓度：102copies/μl和103copies/μl及108copies/μl.2.研究结果AB.real-timeRT-PCR测定结果1：SW480；2：SGC；3：U937；4：hBM-MSC.BC.RT-PCR测定结果1：SW480；2：SGC；3：U937；4：hBM-MSC.C图4.FP248在肿瘤细胞中的表达注：A.real-timeRT-PCR扩增曲线。B.real-timeRT-PCR检测FP248mRNA实验重复3次。1：U937；2：SGC；3：hBM-MSC；4：PLA801-95D；5：A549。C.RT-PCR检测FP248mRNAb：blank；1：U937；2：SGC；3：hBM-MSC；4：PLA801-95D；5：A549；6：PC3；7：SW480；M：DNAmarker(100bpsDNALadder)。图5.FP248在肿瘤细胞中的表达1A2B3C4表.骨髓标本和标本资料注：以上标本由江