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增殖缺陷型腺病毒介导人内皮抑素基因抗乳
腺癌的实验
【摘要】目的通过建立裸鼠乳腺癌肿瘤模型，在体内实验中进
一步证实携带人内皮抑素基因的增殖缺陷型腺病毒AdhE的抗肿瘤
作用。方法在BALB/c裸鼠皮下种植人乳腺癌细胞MCF7，建立移植
瘤模型。在瘤体内注射AdhE治疗，观察肿瘤生长，免疫组化检测肿
瘤细胞内皮抑素的表达和计数肿瘤间质中微血管的数量。结果AdhE
具有明显抑制肿瘤细胞生长的作用，瘤体内注射重组腺病毒后4周，
AdhE治疗组肿瘤体积为（225.3±90.2）mm3，明显小于AdLacZ
病毒对照组（794.9±189.8）mm3和空白对照组（890.7±102.5）mm3。
免疫组化显示，乳腺癌细胞在感染腺病毒后能够有效表达内皮抑素，
阳性细胞比率超过60％以上。AdhE治疗组瘤组织中血管数量（16.3
±7.3）明显少于空白对照组（54.6±17.6）和AdLacZ病毒对照组
（49.8±21.2）。结论增殖缺陷型腺病毒介导人内皮抑素的表达，具
有明显抑制肿瘤细胞生长的作用。
【关键词】腺病毒内皮抑素乳腺癌基因治疗
0引言
近年来，抗肿瘤血管生成的基因治疗策略倍受关注［1］，已
发现的多种具有抑制肿瘤血管生成的活性物质中以血管抑素和内皮抑
素最为引人注意［2，3］。前期我们构建了携带人内皮抑素基因（human
endostatin，hE）的增殖缺陷型腺病毒AdhE，并在体外细胞学实验
中证实AdhE感染乳腺癌细胞株MDAMB231和MCF7后，可介导
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内皮抑素基因的高效表达，且表达的内皮抑素可明显抑制人脐静脉内
皮细胞株ECV304细胞的生长［4］。在此基础上，本文通过建立裸鼠乳
腺癌模型，开展体内实验进一步证实AdhE的抗肿瘤作用。
1材料与方法
1.1材料来源
携带人内皮抑素基因（Humanendostatin,hE）的增殖缺陷
型腺病毒AdhE和携带报告基因LacZ的增殖缺陷型腺病毒AdLacZ
由我们自己构建并保存，人乳腺癌细胞株MCF7购于美国ATCC细胞
库，鼠抗人hE单克隆抗体、鼠抗人CD31单克隆抗体、SP免疫组化试
剂盒购自福州迈新生物技术公司。
1.2肿瘤模型的建立
5周龄BALB/c裸鼠30只，雌雄各半，中科院上海实验动物
中心提供。取对数生长期的MCF7细胞，用PBS液调整细胞数至1×
108/ml，按100μl／只接种于裸鼠乳房脂肪垫，恒温、通风、无菌条
件下饲养。每日定时观察瘤体生长情况，当接种区皮下出现米粒至黄
豆大小硬结，即为种植成功。
1.3病毒治疗
将成瘤的裸鼠随机分为3组（AdhE组、AdLacZ组、空白
对照组），每组10只，称重，编号。以1×108pfu/100μl的重组病毒
（AdhE组、AdLa
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