《人工授精技术》培训课件.ppt

?冷冻时细胞的损伤冰晶：在0～-60℃低温区，缓慢降温条件下形成的，降温越慢，冰晶越大，-15～-25℃对精子危害最大。冰晶的形成对精子造成的机械损伤和渗透压损伤是引起精子死亡的主要物理因素。玻璃化：在-60～-250℃超低温区，从冰晶化区域内开始，就快速降温，迅速越过冰晶化进入玻璃化阶段，此阶段对精子无害。?添加冷冻保护剂（甘油，二甲基亚砜等）作用：增强精子抗冻能力，并对防止冰晶发生起到重要作用。★（2）精液冷冻技术牛的精液冷冻已普及，现以牛精液冷冻为例，将精液冷冻制作技术叙述如下：◆采精及精液品质检查：精液冷冻效果与精液品质密切相关。做好采精的准备和操作，争取获得优质的精液。◆精液稀释：根据冻精的种类、分装剂型和稀释倍数的不同，精液的稀释方法也不尽一致，现生产中多采用一次或两次稀释法：A、一次稀释法：将含有甘油、卵黄等的稀释液按一定比例加入精液中，适合于低倍稀释。B、两次稀释法：为避免甘油与精子接触时间过长而造成的危害，采用两次稀释法较为合理。首先用不含甘油的稀释液(第一液)对精液进行最后稀释倍数的半倍稀释，然后把该精液连同第二液一起降温至0-5℃(全程1h左右)，并在此温下作第二次稀释。◆降温平衡降温后，把稀释后的精液放置在0-5℃的环境中停留2—4h，平衡的目的是使精子有一段适应低温的过程，同时使甘油充分渗入精子内部，达到抗冷冻保护作用。◆精液分装A、颗粒冻精B、细管冻精◆冻结A、颗粒冻精冷冻：在广口液氮桶上安装铜纱网，调至距液氮面1—3cm，预冷几分钟后，使纱网附近温度达-80—-1000C，将精液均匀地滴压在铜纱网上，2-4min后，待精液颗粒充分冻结、颜色变浅发亮时，用小铲轻轻铲下颗粒冻精，每50-100粒装入纱布袋中，沉入液氮保存。B、细管冻精：除按上述方法对细管进行熏蒸冷冻外，也可采用液氮浸泡法。把分装好的精液细管平铺于特制的细管架上，放人盛装液氮液氮柜中浸泡，盖好，5min后取出保存。这种方法启动温度低，冷冻效果好。◆冻精解冻A、低温水解冻（0—5℃）B、温水解冻（30—40℃）：效果最好C、高温解冻（50—70℃）牛细管精液解冻★（3）冻精的保存与运输目前，冻精保存普遍采用液氮做冷源，以液氮罐为容器贮存和分发冻精。◆液氮及其特性液氮是空气中的氮气经分离、压缩形成的一种无色、无味、无毒的液体，沸点温度为—195．8℃。在常温下，液氮沸腾，吸收空气中的水气形成白色烟雾。液氮具有很强的挥发性，当温度升至18℃时，其体积可膨胀680倍。此外，液氮又是不活泼的液体，渗透性差，无杀菌能力。基于液氮的上述特性，使用时要注意防止冻伤、喷溅、窒息等，用氮量大时要保持空气通畅，注意保护。◆液氮容器包括液氮贮运容器和冻精贮存容器，前者为贮藏和运输液氮用，后者为专门保存冻精用(图5—9)。当前冷冻精液专门使用的液氮罐型号较多，但其结构基本相同。A、罐壁由内外两层构成，一般由坚硬的合金制成。B、夹层指内外壳之间的空隙。为增加罐的保温性，抽成真空。真空度为1．33X10-4pa，在夹层中装有活性碳、硅胶及镀铝绦纶薄膜等，以吸收漏入夹层的空气，也增加了罐的绝热性。C、罐颈由高热阻材料制成，是连接罐体和罐壁的部分，较为坚固。D、罐塞由绝热性好的塑料制成，具有固定提筒手柄和防止掖氮过厦挥发的功能。E、提筒是存放冻精的装置。提筒的手柄由绝热性良好的塑料制成，既能防止温度向液氮传导，又能避免取冻精时冻伤。提筒的底部有多个小孔，以便液氮渗入其中。1、内外壳体2、内槽3、夹层4、颈管5、罐盖塞6、提筒液氮罐结构从液氮罐取冻精液氮容器使用应注意的问题液氮容器主要是靠真空和减少导热来维持其冷藏性能。使用时应注意：A、用前仔细检查外观，看是否又碰伤；然后倒入液氮检查其损耗情况。B、存放于阴凉、干燥、通风良好的室内，严禁靠近热源和室外日晒雨淋。C、使用过程中尽量避免碰撞、振动，严禁横放、叠放或倒置。D、存放液氮的容器要用瓶塞盖好，但瓶口不能密闭，以防爆炸。F、存放精液等要定期补充液氮，确保冻精浸入液氮中。G、取放冻精时，要尽量避免碰撞颈口。H、液氮罐要定期清洗，以免污染冻精。畜禽输精技术内容一家畜输精技术二家禽输精技术一家畜输精技术?输精是人工授精的最后一个环节，也是最重要的技术之一，能否及时、准确地把精液输送到母畜生殖道的适当部位，是保证受胎的关键。输精前应做好各方面的准备，确保输精的正常实施。（1）母畜的准