基于BMP-SmadRUNX2信号通路探讨固本增骨方含药血清对大鼠BMSCs增殖和成.pdfVIP

世界科学技术-中医药现代化★中药研究

基于BMP-Smad/RUNX2信号通路探讨

固本增骨方含药血清对大鼠BMSCs增殖

和成骨分化的影响＊

111，2＊＊34

宋敏，巩彦龙，董平，董万涛，蒋林博

（1.甘肃中医药大学兰州730000；2.内蒙古医科大学呼和浩特010110；3.甘肃中医药大学附属医院兰州

730020；4.深圳市罗湖区中医院深圳518000）

摘要：目的基于BMPs-Smad/RUNX2信号通路探讨固本增骨方含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞

增殖及成骨分化的作用机制。方法制备固本增骨方含药血清；台盼蓝染色观察细胞生长情况；取P3代大

鼠BMSCs分为空白血清组、5%、10%、20%、30%浓度含药血清组及传统诱导组，分别对各组大鼠BMSCs进行

培养及成骨诱导，向6组加入相应培养液24h后幵始测量细胞计数，连续测量4天；成骨诱导2周后，进行碱

性磷酸酶染色试剂盒说明书进行染色，光镜下观察各组细胞蓝紫色区域的密集程度；ELISA法检测COL-I、

ALP、BGP、OPN蛋白的含量；Real-timePCR检测BMPs信号通路相关基因BMP2、BMP4、Smad1、RUNX2表

达。结果各组固本增骨方含药血清组在培养24h后比空白组及传统成骨诱导组OD值比较差异均具有统

计学意义（P0.05），并且20%含药血清组较5%、10%及30%含药血清组OD值比较差异具有统计学意义

（P0.05）；碱性磷酸酶染色后镜下观察在浓度为20%时染色区域最密集；5%、10%、20%含药血清组与其他

各组BGP、OPN、ALP、COL-I含量比较差异具有统计学意义（P0.05），且20%含药血清组与5%、10%含药

血清组比较差异具有统计学意义（P0.05）；20%含药血清组与其他各组BMP2、BMP4、Smad1、RUNX2

mRNA表达比较差异均具有统计学意义（P0.05）。结论固本增骨方能促进BMSCs的增殖，并且能促进

成骨标志蛋白BGP、OPN、ALP、COL-I蛋白含量的增加，且在20%浓度为最佳，这个机制可能是激活了BMP-

Smad/RUNX2信号通路实现的。

关键词：固本增骨方BMP-Smad/RUNX2信号通路含药血清骨髓间充质干细胞成骨分化

doi:10.11842/wst.20190321006中图分类号:R274.9文献标识码:A

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骨髓间充质干细胞（bonemarrowmesenchymal骨内稳态方面具有关键作用，这些细胞参与多种骨

stemcells，BMSCs）的终末分化细胞是成骨细胞

病尤其是骨质疏松症（Osteoporosis，OP）的病理生理过

（Osteoblasts，OB），现有的研究已知OB和破骨细胞程。随着年龄的不断增加，性激素缺乏等多种因素造

（Osteoclast，OC）之间的动态平衡，在维持骨微结构和成OB与OC间动态平衡关系被破坏，表现为骨破坏增

收稿日期：2019-03-21

修回日期：2019-04-16

＊甘肃省科技厅甘肃省自然科学基金项目(1506RJZA048)：固本增骨颗粒含药血清对小鼠MC3T3-E1细胞株的影响及