医学检验的技能操作.pptVIP

KIA成分中含有葡萄糖和乳糖，二者比例为1：10，指示剂为酚红，其在PH6.8时变为黄色，而KIA的PH为7.4，产少量的酸就可导致颜色变化。斜面部分暴露于空气中，为有氧环境。而下部与空气隔绝是相对厌氧的环境。因此配KIA或TSI时，最重要的是斜面部分和管下部琼脂的长度，两者均为3cm，以保证两部分相对应的有氧或厌氧环境。用针穿刺时，取单个菌落，穿刺至底部3-5mm处，然后在斜面上往复划线。放35度培养18-24小时。A.非发酵型：无碳氢化合物发酵，所以无酸产生，斜面上琼脂的肽降解产物是碱性物质导致斜面变红。这种类型的细菌称为非发酵型。B.非乳糖发酵型:如果接种的是发酵葡萄糖不发酵乳糖的细菌，培养基内仅有0.1%葡萄糖可以产酸。开始阶段，培养8-12h时，产生的酸足以引起斜面和底部颜色变成黄色。在接下来的时间里，葡萄糖被完全消耗，斜面部分的细菌在有氧条件下开始氧化降解氨基酸，产生的胺类很快就中和斜面上存在的酸；到18-24h，整个斜面又转换成碱性PH，颜色有变成红色。深部（厌氧区域），氨基酸降解不足以中和形成的酸，培养基仍为黄色。不发酵乳糖的细菌在斜面所产生的酸，主要是被需氧产生的相当量的碱性代谢产物所中和而变碱，这时斜面呈红色，反之，发酵乳糖的大肠杆菌则因培养基中乳糖含量大，分解后产生酸量亦大，因此碱性产物被酸性物质盖过，斜面和基底就同样都呈强酸性而变黄色。志贺菌KIA（KA－－）MIU（－－－）肺炎克雷伯菌KIA（AA＋＋）、MIU（－－＋）O-F试验产碱型氧化型发酵型大肠埃希菌IMViC试验（＋＋－－）

右侧为对照（－－＋＋）双糖铁动力肠编码（IMViC）01未接种02接种后03乳糖+葡萄糖+H2S—04②生化反应1，选择适当移液器，调到适当体积2，移液器用后回归到最大容积微量移液器的使用4平视，平视液体凹面，目光随液面下降移动2定容，定容时,先擦拭后定容，靠壁，大概角度（45）3擦拭，每次移液都需擦拭5释液，靠壁释液，一定的角度；释液速度均匀，吹剩余液体1,0刻度，每次移液从0刻度开始移液1正确波长12润洗适当口径比色杯23适当档位34适当液体调零45废液回归56正确读取吸光度，注意有效数字6分光光度计KIA成分中含有葡萄糖和乳糖，二者比例为1：10，指示剂为酚红，其在PH6.8时变为黄色，而KIA的PH为7.4，产少量的酸就可导致颜色变化。斜面部分暴露于空气中，为有氧环境。而下部与空气隔绝是相对厌氧的环境。因此配KIA或TSI时，最重要的是斜面部分和管下部琼脂的长度，两者均为3cm，以保证两部分相对应的有氧或厌氧环境。用针穿刺时，取单个菌落，穿刺至底部3-5mm处，然后在斜面上往复划线。放35度培养18-24小时。A.非发酵型：无碳氢化合物发酵，所以无酸产生，斜面上琼脂的肽降解产物是碱性物质导致斜面变红。这种类型的细菌称为非发酵型。B.非乳糖发酵型:如果接种的是发酵葡萄糖不发酵乳糖的细菌，培养基内仅有0.1%葡萄糖可以产酸。开始阶段，培养8-12h时，产生的酸足以引起斜面和底部颜色变成黄色。在接下来的时间里，葡萄糖被完全消耗，斜面部分的细菌在有氧条件下开始氧化降解氨基酸，产生的胺类很快就中和斜面上存在的酸；到18-24h，整个斜面又转换成碱性PH，颜色有变成红色。深部（厌氧区域），氨基酸降解不足以中和形成的酸，培养基仍为黄色。不发酵乳糖的细菌在斜面所产生的酸，主要是被需氧产生的相当量的碱性代谢产物所中和而变碱，这时斜面呈红色，反之，发酵乳糖的大肠杆菌则因培养基中乳糖含量大，分解后产生酸量亦大，因此碱性产物被酸性物质盖过，斜面和基底就同样都呈强酸性而变黄色。*