DBS32 012-2016 食品安全地方标准 食品中喹啉黄的检测 高效液相色谱法、液相色谱-质谱质谱法　　.docxVIP

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江苏省地方标准

DBS32/012—2016

食品安全地方标准

食品中喹啉黄的检测高效液相色谱法、液

相色谱-质谱/质谱法

2016-12-23发布2017-02-01实施

江苏省卫生和计划生育委员会发布

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前言

本标准系首次发布。

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食品安全地方标准

食品中喹啉黄的检测高效液相色谱法、液相色谱-质谱/质谱法

1范围

本标准规定了食品中喹啉黄的两种测定方法－高效液相色谱法和液相色谱-质谱/质谱法。本标准适用于糖果、酒、巧克力制品中喹啉黄含量的测定。

第一法高效液相色谱法

2原理

用提取液提取试样中的喹啉黄，经固相萃取柱净化后，用高效液相色谱紫外检测器测定，根据保留时间定性、以峰面积定量。

3试剂和材料

3.1总则

除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。

3.2试剂

3.2.1甲醇（CH3OH）：色谱纯。

3.2.2甲酸（HCOOH）：色谱纯。

3.2.3氨水（NH3?H2O）：含量20%～25%。

3.2.4乙酸铵（CH3COONH4）。

3.2.5柠檬酸（C6H8O7?H2O）。

3.3试剂配制

3.3.1氨水-甲醇溶液（1+9，体积比）：量取氨水10mL、甲醇90mL，混匀。

3.3.2甲醇-水溶液（7+3，体积比）：量取甲醇70mL、水30mL，混匀。

3.3.3甲醇-甲酸-水溶液（2+2+6，体积比）：量取甲醇20mL、甲酸20mL、水60mL，混匀。

3.3.4柠檬酸溶液（20g/L）：称取2.0g柠檬酸，加水溶解并定容100mL。

3.3.5乙酸铵溶液（0.02mol/L）:称取1.54g乙酸铵，加水溶解并定容至1000mL，经0.45μm水相微孔滤膜过滤。

3.3.6初始流动相：量取20mL甲醇、80mL乙酸铵溶液（0.02mol/L）（3.3.5），混匀。

3.4喹啉黄标准品：纯度大于97%。

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喹啉黄标准品是以QYNa2Ⅰ、QYNa2Ⅱ、QYNaⅠ、QYNaⅡ为主的混合物。喹啉黄标准品详细信息及各组分含量的测定见附录A。

3.5标准溶液配制

3.5.1喹啉黄储备液（1.0mg/mL）：准确称取喹啉黄标准品（3.4）100.0mg，用水溶解并定容至100mL，室温保存。

3.5.2喹啉黄标准曲线工作液：吸取标准储备液用水稀释，得到喹啉黄浓度为5.0μg/mL、10.0μg/mL、20.0μg/mL、50.0μg/mL、100.0μg/mL的标准溶液。

4仪器和设备

4.1高效液相色谱仪，带紫外检测器。

4.2氮气吹干仪。

4.3离心机：转速≥5000r/min。

4.4天平：感量为0.001g和0.0001g。

4.5具塞塑料离心管：50mL。

4.6涡旋混合器。

4.7固相萃取装置。

4.8聚酰胺固相萃取柱（500mg，3mL）或性能相当者。使用前先依次用3mL甲醇、3mL水活化。

4.9水相微孔滤膜：0.45μm。

5分析步骤

5.1试样制备

5.1.1提取5.1.1.1酒

移取2.0mL试样于50mL具塞塑料离心管中，加入10mL水混匀后，待净化。5.1.1.2糖果

称取2g（精确至0.01g）已粉碎样品于50mL具塞塑料离心管中，加水10mL，温热溶解，离心5min（5000r/min），转移上清液至另一离心管中，残渣用5mL水重复提取一次，合并提取液待净化。

5.1.1.3巧克力

称取2g（精确至0.01g）已粉碎样品于50mL具塞塑料离心管中，加入10mL甲醇-水溶液（3.3.2）,涡旋混匀5min，离心5min（5000r/min），转移上清液至另一离心管中，残渣用5mL甲醇-水溶液（3.3.2）重复提取一次，合并提取液待净化。

5.1.2净化

测定提取液的pH值，若提取液pH值6，需用柠檬酸溶液(3.2.4)调pH值到4.0±0.2。将提取液转移至已活化的固相萃取柱（4.8）中，再用1mL甲醇-甲酸-水溶液（3.3.3）充分洗涤离心管，全部转移至固相萃取柱中，弃去流出液；然后依次用3mL甲醇-甲酸-水