糖类测定方法大全.pdfVIP

糖类测定方法大全

（一）测定方法概述

（二）可溶性糖类的提取和澄清

1、提取液制备

（1）常用提取剂——水、乙醇

（2）提取液中含糖量控制0.5～3.5mg/mL

（3）含脂肪食品先脱脂，然后用水提取

（4）含淀粉及糊精食品（乙醇沉淀淀粉等）用70～75％乙醇溶

液提取

（5）含乙醇及CO2液态食品，蒸发至1/3～1/4原体积，以除

去C2H5OH及CO2

（6）酸性食品应先中和防止低聚糖部分水解

（7）提取固体样品有时需要加热，以提高提取效果。一般在40～

50℃，防止多糖溶出

（8）乙醇作提取剂加热时应安装回流装置

2、提取液的澄清

（1）影响测定的杂质

色素、蛋白质、果胶、可溶性淀粉、有机酸、氨基酸、单宁，

可影响颜色、浑浊、过滤困难。

（2）澄清剂

①醋酸铅（中性）Pb（CH3COO）2·3H2O，形成沉淀，

吸附杂质，可除去蛋白质、果胶、有机酸、单宁等。

②乙酸锌和亚铁氰化钾二者生成氰亚铁酸锌↓吸附蛋白

质等干扰物。

③硫酸铜和氢氧化钠，Cu离子使蛋白质沉淀。

（3）澄清剂用量

用量适宜，以无新沉淀为准，如2ml饱和醋酸铅（30％）。

（4）除铅剂

由于铅影响还原糖的测定，生成铅糖化合物。

常用除铅剂有草酸钠、硫酸钠、磷酸氢二钠。

（三）蓝—爱农（Lane-Eynon）法

测定还原糖

（国际上常用的定量糖的方法）

1、原理

斐林试剂甲液（CuSO4·5H2O）

斐林试剂乙液（酒石酸钾钠+NaOH）

甲、乙混合→酒石酸钾钠合铜

酒石酸钾钠合铜+葡萄糖→葡萄糖酸+Cu2O↓（红棕）

终点的确定：

葡萄糖+亚甲基蓝（氧化态）→亚甲基蓝（还原态）

过量兰色无色

（兰色消失）

终点时的颜色为：兰色消失了的红棕色

2、测定

预测

准确吸取斐林试剂甲液5.00mL、乙液5.00mL→锥形瓶中，△至

沸腾，再加入亚甲基蓝指示剂，在加热的条件下，用样液滴至

蓝色褪尽。（先快后慢，要求很快达到终点，因为亚甲基蓝易

被空气氧化为蓝色，且要求在加热的情况下以除去空气）

测定

甲液5mL、乙液5mL→锥形瓶中，加入比上述预测量少0.5～1ml

样液在2min内沸腾，维持沸腾2min，加入3滴亚甲基蓝指示

剂，再在3min内滴定至蓝色褪尽。

3、计算

F

还原糖%=×100

(V1/V)×m

m--样品质量，mg；V1--滴定量mL；V--样液总mL；

F--还原糖因素，10mL费林试剂，相当的还原糖量mg

F的求得有两种方法：

A、用标准还原糖液用上面同样方法标定10ml费林试剂求得。

B、查蓝—爱农法专用“还原糖因数表”附表

例若V1=26则F=49.9

（四）直接滴定法测定还原糖

1、原理（GB/T5009.7-1985)

斐林试剂甲液（CuSO4·5H2O+亚甲基蓝），斐林试剂乙液（酒

石酸钾钠+NaOH+亚铁氰化钾，混合→酒石酸钾钠合铜，酒石酸

钾钠合铜+葡萄糖→葡萄糖酸+Cu2O↓（红棕），亚铁氰化钾使

Cu2O↓（红棕）生成无色络合物K2Cu2Fe(CN)6。

Cu2O+K4Fe（CN）6+H2O→K2Cu2Fe（CN）6+2KOH

红棕无色

终点的确定：葡萄糖+亚甲基蓝（氧化态）→亚甲基蓝（还原

态

过量兰色无色

2、测定

①碱性酒石酸铜溶液的标定

（乙液（内有亚铁氰化钾）

取甲、乙液各5.00mL，加