2.2.2 动物细胞融合技术与单克隆抗体（课件）高二生物（人教版2019选择性必修3）.pptx

第2章细胞工程2.2动物细胞工程第2课时——动物细胞融合技术与单克隆抗体

阐明利用动物细胞融合技术制备单克隆抗体的过程，认同单克隆抗体在临床上有重要应用价值学习目标

植物体细胞杂交植物细胞融合植物组织培养意义：打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育植物新品种。【温故而知新】请同学们回想一下“植物体细胞杂交技术”的过程利用什么技术可以打破植物间的生殖隔离？问—植物体细胞杂交技术那有没有什么技术能让不同种的动物的体细胞杂交呢？

一、动物细胞融合技术自主阅读教材P48，独立思考并回答下列问题：（时间3min）1.动物细胞融合的概念？2.动物细胞融合的过程？3.动物细胞融合的原理？4.诱导动物细胞融合的方法？5.细胞融合后的结果？6.动物细胞融合的意义（优点）？7.动物细胞融合的应用？

一、动物细胞融合技术使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。1、概念：3、原理：2、过程:细胞膜的流动性5、结果：4、诱导方法物理法：电融合法化学法：聚乙二醇（PEG)生物法：灭活病毒诱导法(动物细胞融合特有)与植物细胞融合的方法相同融合后形成的杂交细胞具有原来两个或多个细胞的遗传信息。

一、动物细胞融合技术正在融合的淋巴细胞与骨髓瘤细胞7、应用：6、意义：突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能。①已经成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和培育生物新品种等的重要手段。②特别是利用动物细胞融合技术发展起来的杂交瘤技术，为制造单克隆抗体开辟了新途径。

一、动物细胞融合技术相关信息灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力，但并不破坏它们的抗原结构。灭活病毒诱导细胞融合的原理是：病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。动物细胞融合实质及完成的标志：细胞核的融合

一、动物细胞融合技术比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合原理步骤细胞融合成功的标志诱导方法结果意义细胞膜的流动性细胞膜的流动性、植物细胞的全能性用纤维素酶和果胶酶去除植物细胞壁↓诱导方法原生质体融合↓形成杂种细胞↓经植物组织培养杂种植株两个或多个动物细胞↓诱导方法动物细胞融合↓形成杂交细胞电融合法、离心法、聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2+—高pH融合法电融合法、PEG融合法、灭活病毒诱导法形成杂种植株形成杂种细胞打破生殖隔离，实现远缘杂交育种突破有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能再生出新的细胞壁细胞核的融合

二、单克隆抗体1.定义：机体受抗原刺激后产生的，能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。体液免疫抗体抗体2.抗体的分布：1）血清（主要）2）组织液及外分泌液（如乳汁中）

二、单克隆抗体1.传统抗体的制备方法及缺陷缺点：产量低、纯度低、特异性差向动物体内反复注射某种抗原使动物产生抗体从动物血清中分离所需抗体有什么方法解决这个问题？1个B淋巴细胞B淋巴细胞群大量单一抗体克隆产生（产量高、纯度高、特异性强）在体外培养条件下，一个B淋巴细胞是不可能无限增殖的！体内产生的特异性抗体多达百万种1抗原传统抗血清（所有抗体混合）免疫11234☆抗体(1)每个B淋巴细胞只分泌一种特异性的抗体

二、单克隆抗体米尔斯坦【英国】科勒【德国】解决1975年，英国科学家米尔斯坦和德国科学家科勒设计了一个极富创造性的试验方案：抗体B淋巴细胞骨髓瘤细胞杂交瘤细胞（分泌特异性抗体）（能在体外大量增殖）（既能迅速大量增殖，又能产生特异性抗体）(单克隆抗体)由于发明了单克隆抗体的制备技术，米尔斯坦和科勒于1984年获得了诺贝尔生理学或医学奖。

二、单克隆抗体【自主阅读，合作探究】自主阅读P48-49图2-16，思考以下问题：（时间：3min）①用特定抗原对小鼠进行免疫的原因？②诱导融合后的细胞有几种类型，若仅考虑两两细胞融合呢？③杂交瘤细胞是如何筛选出来的？④是否所有的杂交瘤细胞都能产生所需的抗体？⑤如何扩大培养得到大量的单克隆抗体？⑥整个过程有几次筛选？目的分别是什么？A1B1A2A3A4B2B3B4合作探究（时间：5min）：1、各小组进行讨论，要求每位同学积极参与；2、讨论完毕，各组推荐一位代表回答抽到的问题；3、每个小组回答后，由对应小组进行评价打分。

二、单克隆抗体☆单克隆抗体制备过程培养骨髓瘤细胞从脾中提取多种B淋巴细胞骨髓瘤细胞诱导融合将骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导法能产生抗体，但不能大量增殖不能产生抗体，但能大量增殖注射特定的抗原获得产生特定抗体的B细胞①用特定抗原对