2.2.1 动物细胞培养-高二生物下学期课件（人教版2019选择性必修3）.pptx

第二节动物细胞工程一动物细胞的培养1.动物细胞培养需要哪些基本条件？2.动物细胞培养的基本操作过程是什么？3.怎样客观分析干细胞在临床上的应用所产生的效益与风险？

动物细胞工程动物细胞工程常用的技术包括动物细胞培养、动物细胞融合和动物细胞核移植等，其中动物细胞培养是动物细胞工程的基础。1.动物细胞培养的条件2.动物细胞培养的过程3.干细胞培养及应用从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适当的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。动物体组织单个细胞细胞生长和增殖取出分散适宜条件原理：细胞增殖（有丝分裂）

动物细胞培养的条件一般来说，动物细胞培养（模拟体内细胞正常生长增殖的环境）需要满足以下条件：动物细胞培养所需的基本条件营养条件其他条件①糖类、②氨基酸、③无机盐、④维生素……无菌、无毒的环境适宜的温度、pH和渗透压适宜的气体环境充足的营养、稳定的内环境

动物细胞培养的条件1.营养条件:(1)合成培养基:将细胞所需的营养物质按_____________严格配制而成。(2)天然成分:_____等。(3)一般使用_____培养基,即培养液。种类和所需量血清液体营养物质主要包括：糖类、氨基酸、无机盐、维生素、促生长因子、微量元素等。血清中含有多种维持细胞代谢和生长的物质，如蛋白质、氨基酸、未知的促细胞生长因子等。合成培养基+血清等天然成分

动物细胞培养的条件2.无菌、无毒的环境:(1)培养液和培养用具_____处理。(2)_____环境下操作。(3)培养液定期更换的原因:_______________________________________________3.温度、pH和渗透压:(1)适宜的温度:哺乳动物多以__________℃为宜。(2)适宜的pH:多数细胞生存的适宜pH为_________。(3)适宜的渗透压。4.气体环境:95%空气和5%CO2的CO2培养箱中。(1)O2作用:_________________。(2)CO2的主要作用:_______________。36.5±0.57.2～7.4细胞代谢所必需的维持培养液的pH清除代谢物,防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害无菌灭菌无菌处理；定期更换培养液；添加抗生素等CO2培养箱

动物细胞培养的过程请同学们自主阅读教材P44-45，小组合作思考讨论完成问题。1.请构建动物细胞培养过程流程图。2.为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？3.为什么将取出的组织分散成单个细胞？如何将组织分散成单个细胞？说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶可以吗？4.在用胰蛋白酶处理组织时应注意什么？5.什么是细胞贴壁？什么是接触抑制？6.为什么要进行分瓶培养？怎么处理？7.什么是原代培养和传代培养？两种“培养”都用到胰蛋白酶处理，对象相同吗？

动物细胞培养的过程取动物组织分散成单个细胞传代培养用机械法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理细胞悬液原代培养分瓶培养加培养液在培养皿或培养瓶内1.取动物组织：部位原因动物胚胎或幼龄动物的组织、器官。分化程度低，增殖能力强2.分散成单个细胞：原因①成块组织中细胞与细胞靠在一起，彼此限制了生长与增殖；②利于与培养液充分接触，保证O2与营养供应和代谢物及时排出。

动物细胞培养的过程原代培养通常将分瓶之前的细胞培养，即动物组织经处理后的初次培养称为原代培养。传代培养将分瓶后的细胞培养称为传代培养。

动物细胞培养的过程第1类：悬浮生长细胞动物细胞培养的类型：第2类：贴壁生长细胞（主流）接触抑制:当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖。悬浮培养瓶细胞贴壁：在培养瓶悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上。

动物细胞培养的过程由于细胞之间有接触抑制的特性，一般的正常细胞并不重叠于其他细胞之上生长，而是单层生长。癌细胞由于无接触抑制而能够继续移动和增殖，导致细胞向三维空间扩展，发生堆积。是否接触抑制可作为区别正常细胞与癌细胞的标志之一。

动物细胞培养的过程解决悬浮生长贴壁生长(大多数）细胞密度过大、有害代谢物积累、营养物质缺乏等接触抑制悬浮培养的细胞:直接用离心法收集贴壁细胞:用胰蛋白酶处理分散成单个细胞，用离心法收集细胞分裂受阻②制成细胞悬液，分瓶培养①收集细胞

动物细胞培养的过程

动物细胞培养比较项目植物组织培养动物细胞培养原理培养基性质培养基特有成分培养结果培养目的相同点获得细胞或细胞产物常用固体培养基植物体葡萄糖、动物血清常用液体培养基细胞增殖细胞的全能性许多细胞快速繁殖等蔗糖、植物激素1.培养过程中细胞都进行有丝分裂，不涉及减数分裂；2.均需无菌操作，需要适宜的温度、pH等条件

我们可否运用动物细胞培养技术在体外培养干细胞使之成为组织或器官吗？动物细胞培养

干细胞培养及其应