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第2节微生物的培养技术及应用1.概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质。2.种类知识点1培养基划分标准培养基种类特点应用物理性质液体培养基不含凝固剂,呈液体状态扩大培养、工业生产等固体培养基含凝固剂(如琼脂),呈
固体状态微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种等划分标准培养基种类特点应用目的用途选择培养基允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长富集、分离出特定的
微生物鉴别培养基根据微生物的代谢特点在培养基中加入某种指示剂或化学药品,进而产生特定的颜色或其他变化鉴别不同种类的微生
物续表3.培养基的成分(1)基本成分营养物质来源功能碳源无机碳源C?、HC?等含碳无机物①构成细胞物质和一
些代谢物;②有机碳既是碳源又
是能源有机碳源糖类、脂质、蛋白
质、有机酸、石油等氮源无机氮源铵盐、硝酸盐等合成蛋白质、核酸及
含氮的代谢物有机氮源牛肉膏、蛋白胨、尿
素、氨基酸等营养物质来源功能水—①溶剂;②参与微生物代谢无机盐无机物①细胞内的组成成
分;②维持渗透压续表特别提醒????牛肉膏和蛋白胨来源于动物,含有糖、维生素和有机氮等营养物质。(2)培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。微生物乳酸杆菌霉菌细菌厌氧微生物特殊需求添加维生素调至酸性调至中性或弱碱性提供无氧环境易错分析????并非所有培养基中都有有机碳源和有机氮源,如培养自养型生物的培养基中可不
含有机碳源,其可利用大气中的CO2;培养自生固氮微生物的培养基中可不含有机氮源,其可
利用大气中的N2。类型操作方法适用范围消毒使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物煮沸消毒100℃煮沸5~6min家庭餐具等生活用品巴氏消毒63~65℃消毒30min或72~76℃处理15s或80~85℃处理10~15s不耐高温的液体,如牛奶化学药物用酒精擦拭双手、用氯气消毒水源等生物活体、水源等紫外线紫外线照射30min接种室、接种箱、超净工作台知识点2无菌技术——消毒和灭菌类型操作方法适用范围灭菌使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物,包括芽孢和
孢子灼烧灭菌酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧接种工具(涂布器、接种环、接种针)、其他金属工具或接种过程中的试管口、瓶口等干热灭菌将灭菌物品放入干热灭箱,在160~170℃的热空气中维持1~2h耐高温、需要保持干燥的物品,如玻璃器皿、金属用具等湿热灭菌高压蒸汽灭菌锅内,100kPa、121℃下维持15~30min培养基等,生产和实验室常用续表特别提醒????(1)对于一些不耐高温的液体,如牛奶,使用巴氏消毒法的优点是在达到消毒目的的同时,基本
不会破坏牛奶的营养成分。(2)在紫外线照射前,适量喷洒苯酚或煤酚皂溶液等消毒液,可以加强消毒效果。知识拓展????(1)芽孢和孢子芽孢孢子概念有些细菌在一定的条件下,细胞里面形成的一个椭圆形的休眠体(不是繁殖体)细菌、原生动物、真菌和植物等产生的一种有繁殖或休眠作用的生殖细胞特点对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力,环境适宜时又可萌发成细菌能直接长成新个体(2)生物消毒法:利用生物或其代谢物除去环境中的部分微生物的方法。如有的微生物能够
寄生于多种细菌体内,使细菌裂解,因此可以用它们来净化污水、污泥。1.相关概念(1)培养物:接种于培养基内,在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体。(2)纯培养物:由单一个体繁殖所获得的微生物群体。(3)纯培养:获得纯培养物的过程。(4)菌落①概念:分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部繁殖形成的肉眼可见的、有一定形态
结构的子细胞群体。②特征:大小、形状、光泽、颜色、透明度等。知识点3微生物的纯培养③功能:鉴定菌种的重要依据。2.酵母菌的纯培养(1)原理??(2)步骤①制备培养基特别提醒????倒平板时如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,则平板不能用来培养
微生物,因为空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。②接种和分离酵母菌:接种环灼烧灭菌,在酒精灯火焰旁冷却后取菌种进行平板划线。③培养酵母菌:完成平板划线后,待菌液被培养基吸收,将接种后的平板和一个未接种的平板
倒置,放入恒温培养箱中培养。(3)平板划线中的操作①灼烧接种环的时间和目的灼烧时间灼烧目的蘸取菌液前杀死接种环上
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