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;3.4蛋白质工程的原理和应用;蛋白质工程是指以作为基础,通过,对现有蛋白质进行,
或制造一种,以满足人类的生产和生活的需求。;01;玉米中赖氨酸的含量比较低,原因是赖氨合成过程中的两种关键酶——天冬氨酸激酶和二氢吡啶二羧酸合成酶的活性,受细胞内赖氨酸浓度的影响较大。赖氨酸达到一定浓度就会抑制这两种酶的活性,所以赖氨酸含量很难提高。如果我们将天冬氨酸激酶中第352位的苏氨酸变成异亮氨酸,将二氢吡啶二羧酸合成酶中第104位的天冬酰胺变成异亮氨酸,就可以使玉米叶片和种子中游离赖氨酸的含量分别提高5倍和2倍。;天然的胰岛素容易形成二聚体,但后续研究发现,改变胰岛素B链末端两个氨基酸导致羧基端构型改变,比如将B28脯氨酸替换成天冬氨酸或B28和29位的氨基酸调换位置,该转换可降低分子自聚力,显著抑制单聚体聚集,可以大大增加吸收速率。;【自主学习】自主阅读课本P94相关内容,完成以下任务:
1、思考蛋白质工程的操作对象是基因还是蛋白质并解释原因。
2、总结蛋白质工程的原理与步骤。;蛋白质工程的操作对象是基因还是蛋白质,为什么?;预期功能;1、蛋白质工程的起点是什么?产物是什么?
起点是从预期蛋白质的功能出发,设计蛋白质的结构,产物是改造后的蛋白质或新的蛋白质。(第一步是蛋白质工程的关键,由于蛋白质高级结构十分复杂,因此蛋白质工程是一项难度很高的工程);2、蛋白质工程的原理是什么?
中心法则,体内蛋白质的合成过程。DNA-mRNA-蛋白质
3、蛋白质工程为什么可以根据功能推测结构?
结构决定功能,功能反映结构
4、为什么可以根据氨基酸序列推测DNA的脱氧核苷酸序列?由此得到的结果是否具有唯一性?为什么?
氨基酸与碱基存在对应关系:密码子表
不唯一,因为密码子表具有简并性
5、蛋白质真正开始操作的第一步是先对什么东西进行改造,改造后,又需要进行什么样的操作?
真正操作的第一步:对原基因进行改造(如用基因的定点突变技术进行碱基的替换),或根???氨基酸序列推导出来的核苷酸序列直接合成新的基因。
后续操作:以上述手段获取的基因作为目的基因,进行基因工程的操作。
;项目;是否合成新的基因;某多肽链的一段氨基酸序列是:;丙氨酸:CGA、CGG、CGT、CGC
色氨酸:ACC
赖氨酸:TTT、TTC
甲硫氨酸:TAC
苯丙氨酸:TTT、TTG;2.确定目的基因的碱基序列后,怎样才能合成或改造目的基因?;补充:基因的定点突变技术1------重叠PCR技术;该过程需要三种引物,第一轮PCR利用突变上游引物和常规下游引物进行扩增;第二轮PCR利用第一轮扩增产物中的一条链作为下游大引物,与常规上游引物一起扩增得到完整的含有突变位点的DNA片段。;补充:基因的定点突变技术3------突变质粒;;;天然蛋白质易形成二聚体或六聚体;天然干扰素不易保存;(3)降低人对小鼠单抗隆抗体的免疫反应;蛋白质工程被广泛用于。如枯草杆菌蛋白酶具有水解蛋白质的作用,常被用于洗涤剂工业、丝绸工业等。迄今为止,利用蛋白质工程获得的该酶的突变体已有上百种,从中可能筛选出一些符合工业化生产需求的突变体,从而提高这种酶的使用价值。;蛋白质工程是一项难度很大的工程,主要是因为蛋白质发挥功能必须依赖于正确的高级结构,而这种高级结构往往十分复杂。要设计出更加符合人类需要的蛋白质,还需要不断地攻坚克难。随着科技的深入发展,蛋白质工程将会给人类带来更多的福祉。;思考:能不能根据人类需要的蛋白质的结构,设计相应的基因,导入合适的宿主细胞中,让宿主细胞生产人类所需要的蛋白质食品呢?;;人类蛋白质组计划是继人类基因组计划之后,生命科学乃至自然科学领域重大的国际合作科研项目。2001年,国际人类蛋白质组组织宣布成立。2003年,该组织正式提出启动两项重大国际合作项目:一项是由中国科学家牵头执行的“人类肝脏蛋白质组计划”;另一项是由美国科学家牵头执行的“人类血浆蛋白质组计划”,由此拉开了人类蛋白质组计划的帷幕。
“人类肝脏蛋白质组计划”是国际上第一个人类组织器官的蛋白质组计划,由我国贺福初院士牵头,这是中国科学家第一次领衔重大国际科研协作计划。它的目标是通过对肝脏蛋白质高通量、规模化的研究,解析肝脏蛋白质在生理、病理过程中的
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