2.2.1 动物细胞培养（课件）高二生物（人教版2019选择性必修3）.pptx

第2章细胞工程2.2动物细胞工程第1课时——动物细胞培养培养皿培养瓶常用的技术：动物细胞培养、动物细胞融合和动物细胞核移植等，其中动物细胞培养是动物细胞工程的基础。人造皮肤

首创动物组织体外培养法体细胞核移植成功创立单克隆抗体技术分离和培养小鼠胚胎干细胞获得诱导多能干细胞我国科学家首次培育了体细胞克隆猴1890年1907年1951年1958年1959年1975年1978年1981年1996年2006年2014年2017年首例胚胎移植成功发现哺乳动物精子获能现象试管家兔诞生胚胎分割移植成功克隆羊多莉诞生单细胞基因组测序进行遗传病筛查的试管婴儿诞生动物细胞工程的发展历程

12阐明动物细胞培养的条件和过程简述干细胞在生物医学工程中有广泛的应用价值学习目标

动物细胞培养41.概念：从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后在适当的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。2.原理：细胞增殖动物体组织单个细胞细胞生长和增殖取出分散适宜条件（增殖方式：有丝分裂）3.地位：动物细胞培养是动物细胞工程的基础。

一、动物细胞培养的条件培养基的构成：一般使用液体培养基，也称为培养液+合成培养基血清等天然成分无菌、无毒的环境适宜的温度、pH和渗透压适宜的气体环境糖类、氨基酸、无机盐、维生素……将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基含有尚未全部研究清楚的细胞所需的营养物质。

一、动物细胞培养的条件无菌、无毒的环境适宜的温度、pH和渗透压适宜的气体环境①适宜的温度：哺乳动物细胞培养的温度多以___________为宜；②适宜的pH：多数动物细胞生存的适宜pH为________；③适宜的渗透压：维持细胞正常的形态和功能。定期更换培养液，以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。36.5±0.5℃7.2-7.4①培养液、培养用具：灭菌处理；②在无菌环境下进行操作；

一、动物细胞培养的条件95%空气+5%CO2的CO2培养箱无菌、无毒的环境适宜的温度、pH和渗透压适宜的气体环境糖类、氨基酸、无机盐、维生素……CO2培养箱维持培养液的pH5%CO2O2：细胞代谢所必需培养皿松盖培养瓶培养容器：

二、动物细胞培养的过程自主探究仔细阅读教材P44-45文字及动物细胞培养过程示意图，完成以下问题，时间3分钟。1.为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞呢？可用什么方法？2.体外培养动物细胞有哪些类型？3.什么是细胞贴壁？什么是接触抑制？4.什么是原代培养和传代培养？5.为什么要进行分瓶培养？怎么处理？6.贴壁生长的细胞，培养过程中两次用胰蛋白酶处理的对象分别是什么？

二、动物细胞培养的过程小组合作1.为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞呢？可用什么方法？2.体外培养动物细胞有哪些类型？3.什么是细胞贴壁？什么是接触抑制？4.什么是原代培养和传代培养？5.为什么要进行分瓶培养？怎么处理？6.贴壁生长的细胞，培养过程中两次用胰蛋白酶处理的对象分别是什么？仔细阅读教材P44-45文字及动物细胞培养过程示意图，完成以下问题，时间5分钟。（重点讨论3、4、5、6题。）

二、动物细胞培养的过程悬浮培养的细胞:直接用离心法收集贴壁细胞:用胰蛋白酶处理分散成单个细胞，用离心法收集取动物组织用机械法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理分散成单个细胞解决悬浮生长贴壁生长(大多数）细胞密度过大、有害代谢物积累、营养物质缺乏等接触抑制传代培养制成细胞悬液原代培养分瓶培养加培养液初次在培养皿或培养瓶内细胞分裂受阻②制成细胞悬液，分瓶培养①收集细胞

二、动物细胞培养的过程1．进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是什么？用胃蛋白酶可以吗？为什么？蛋白质。不可以用胃蛋白酶。多数动物细胞生存的适宜pH为7.2～7.4，胃蛋白酶(适宜pH为1.5左右)在此环境中没有活性，而胰蛋白酶在此环境中活性较高，因此胰蛋白酶适用于细胞培养时的处理。

二、动物细胞培养的过程2．“细胞增殖到互相接触的时候，糖蛋白识别了这种信息，就会使细胞停止分裂繁殖，出现接触抑制的现象”。试结合上述解释，举例说明哪种细胞无接触抑制现象，并阐述原因。癌细胞；癌细胞的细胞膜上糖蛋白等物质减少单层细胞多层细胞

二、动物细胞培养的过程比较项目植物组织培养动物细胞培养原理培养基培养基特有成分过程结果相同点固体培养基葡萄糖、动物血清液体培养基细胞增殖植物细胞的全能性新的细胞蔗糖、植物激素①都进行有丝分裂，不涉及减数分裂；②均需无菌操作，需要适宜的温度、pH等条件新的植株外植体↓脱分化愈伤组织↓再分化