人教版高中生物选择性必修3第2章细胞工程第2节动物细胞工程课件.ppt

特别提醒????iPS细胞最初是由成纤维细胞转化而来的,后来发现已分化的T细胞、B细胞等也

能被诱导为iPS细胞。1.动物细胞融合技术(1)概念:使两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的技术。(2)原理:细胞膜的流动性。(3)方法知识点3动物细胞融合技术物理法化学法生物法电融合法PEG融合法灭活病毒诱导法(4)结果:形成具有原来两个或多个细胞遗传信息的杂交细胞。(5)意义:突破了有性杂交的局限,使远缘杂交成为可能。知识拓展????(1)灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力,但并不破坏它们的抗原结构。(2)灭活病毒诱导细胞融合过程①动物细胞融合的过程包括细胞膜融合、细胞质融合和细胞核融合。②经融合处理后的细胞不可以直接用于培养,还需要筛选。因为诱导融合的手段只是促进了细胞间的融合,不能保证所有的细胞都发生融合,融合后形成的细胞也有多种。2.动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较(见定点2)1.单克隆抗体制备原理知识点4单克隆抗体及其应用细胞类型特点B淋巴细胞一种B淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体;体外培养条件下,一个B淋巴细胞不能无限增殖骨髓瘤细胞不能分泌抗体;能在体外大量增殖杂交瘤细胞能产生单一抗体;能迅速大量增殖2.单克隆抗体制备过程?筛选1筛选2筛选原因诱导融合后得到多种杂交细

胞,另外还有未融合的细胞和

同种细胞融合后形成的细胞由于小鼠在生活中还受到其

他抗原的刺激,因此经选择培

养获得的杂交瘤细胞中有能

产生其他抗体的细胞筛选目的筛选出杂交瘤细胞筛选出能产生特异性抗体的

杂交瘤细胞筛选1筛选2筛选方法用特定的选择培养基(HAT

培养基)进行筛选:未融合的

细胞和同种细胞融合后形成

的细胞都会死亡,只有融合的

杂交瘤细胞才能生长用96孔板培养和筛选:在每一

个孔中尽量只接种一个杂交

瘤细胞的情况下进行克隆化

培养和抗体检测,经多次筛选

得到足够数量的能分泌所需

抗体的细胞原理选择培养抗原与抗体特异性结合续表3.单克隆抗体的优点(1)能准确识别抗原的细微差异,与特定抗原发生特异性结合。(2)可大量制备。4.单克隆抗体的应用(1)运载药物,如将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合(抗体—药物偶联

物),可选择性杀伤肿瘤细胞。(2)用作诊断试剂。(3)治疗疾病。1.动物细胞核移植技术:将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中,使这个重新组合的

细胞发育成新胚胎,继而发育成动物个体的技术。知识点5动物体细胞核移植技术和克隆动物2.原理:动物细胞核具有全能性。3.哺乳动物核移植的类型类型特点胚胎细胞核移植动物胚胎细胞分化程度低,表现全能性相对

容易体细胞核移植动物体细胞分化程度高,表现全能性十分困

难动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。4.体细胞核移植过程(以克隆高产奶牛为例)?(1)选用的核供体应为具有优良性状的个体,提供卵母细胞的个体和代孕个体只需为同一物

种的健康雌性个体即可。(2)选用去核卵母细胞作为受体细胞的原因①卵母细胞体积比较大,易操作。②卵母细胞的细胞质多,营养丰富,含有能激发细胞核全能性表达的物质。(3)对卵母细胞进行去核操作的原因:使克隆动物的核遗传物质全部来自有重要利用价值的

动物提供的体细胞。(4)克隆动物的遗传物质和性状分析①克隆动物核内遗传物质全部来自供体细胞,由于受细胞质遗传物质、环境等的影响,克隆

动物与体细胞核供体的性状基本相同,而不是完全相同。②代孕母体没有为克隆动物提供遗传物质,克隆动物的性状与代孕母体没有直接关系。1.概念:从动物体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后在适宜的培养条件下,让这些

细胞生长和增殖的技术。2.基本条件知识点1动物细胞培养——动物细胞工程的基础第2节动物细胞工程基本条件具体处理营养合成培养基(细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成)+血清等天然成分;培养基类型:液体培养基基本条件具体处理无菌、无毒的环境培养液和所有培养用具灭菌处理;操作环境无菌;定期更换培养液(目的:清除代谢物,防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害)温度、pH和渗透压温度:36.5±0.5℃(多数哺乳动物细胞);pH:7.2~7.4(多数动物细胞);渗透压:需维持细胞正常形态气体环境CO2培养箱:95%空气+5%CO2;O2的作用:细胞代谢所必需;CO2的主要作用:维持培养液的pH续表3.培养过程?(1)细胞贴壁:细胞贴附在培养瓶瓶壁上生长增殖的现象。(2)接触抑制:当