从枯草杆菌发酵液中提取a淀粉酶的工艺流程.pdf

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从枯草杆菌发酵液中提取a淀粉酶的工

艺流程

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从枯草杆菌发酵液中提取a淀粉酶的工艺流程

一、准备工作阶段。

在正式开展从枯草杆菌发酵液中提取a淀粉酶之前,要做好充分的准

备工作。

1.确定所需设备和试剂:根据提取工艺要求,准备发酵罐、离心机、

超滤设备、层析柱等设备,以及缓冲液、提取剂、洗脱液等相关试剂。

2.培养枯草杆菌:选取合适的枯草杆菌菌株,在适宜的培养基和条件

下进行培养,使其充分生长繁殖,以获得足够的发酵液。

3.对设备进行检查和调试:确保所有设备处于良好的工作状态,对发

酵罐的温度、搅拌等参数进行校准,检查离心机、超滤设备等是否能正

常运行。

二、发酵阶段。

1.将培养好的枯草杆菌接种到发酵罐中,按照设定的条件进行发酵培

养,包括温度、pH值、溶氧等参数的控制。

2.在发酵过程中,定时取样检测发酵液中a淀粉酶的活性和浓度,以

确定最佳的收获时间。

三、提取阶段。

1.发酵结束后,将发酵液取出,通过离心分离去除其中的细胞和其他

杂质。

2.收集上清液,利用超滤设备对上清液进行浓缩,以提高a淀粉酶的

浓度。

3.向浓缩后的溶液中加入适量的提取剂,使a淀粉酶充分溶解。

四、纯化阶段。

1.将提取后的溶液通过层析柱进行层析分离,根据a淀粉酶与杂质在

层析柱上的不同吸附和洗脱特性,实现a淀粉酶的纯化。

2.收集含有a淀粉酶的洗脱液,对其进行进一步的浓缩和精制。

五、检测和鉴定阶段。

1.采用合适的方法对提取纯化后的a淀粉酶进行活性检测,确保其具

有良好的酶活性。

2.利用各种分析技术,如电泳、质谱等,对a淀粉酶进行鉴定和分析,

确定其纯度和性质。

六、成品处理阶段。

1.将纯化后的a淀粉酶进行适当的包装和储存,根据需要可制成冻干

粉或液体成品。

2.对提取过程中产生的废弃物进

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