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课时规范练52基因工程的基本工具与操作程序
必备知识基础练
考点一重组DNA技术的基本工具
1.培育转基因抗虫棉的过程中需要使用多种酶,下列相关叙述错误的是()
A.限制酶能识别特定的碱基序列,并使特定位点的磷酸二酯键断开
B.E.coliDNA连接酶只能将具有互补黏性末端的DNA片段连接起来
C.RNA聚合酶识别并结合到启动子上才能驱动基因转录出mRNA
D.TaqDNA聚合酶在PCR过程中只能沿引物的5端延伸DNA子链
2.(广东普宁期中)下列有关限制酶和DNA连接酶的叙述,正确的是()
A.用限制酶酶切获得一个外源基因时得到两个切口,有两个磷酸二酯键被断开
B.限制酶识别序列越短,则该序列在DNA中出现的概率就越大
C.序列—CATG↓—和—G↓GATCC—被限制酶切出的黏性末端碱基数不同
D.T4DNA连接酶和E.coliDNA连接酶都能催化平末端和黏性末端的连接
3.(北京海淀模拟)科研人员利用农杆菌转化法将抗病毒蛋白基因C导入番木瓜,培育出转基因抗病毒番木瓜,Ti质粒结构模式如图所示。下列叙述正确的是()
A.农杆菌的T-DNA与番木瓜基因发生重组
B.构建重组质粒需要限制酶和DNA聚合酶
C.含重组Ti质粒的农杆菌具有四环素抗性
D.转基因抗病番木瓜不具有卡那霉素抗性
考点二基因工程的基本操作程序
4.(山西大同质检)为了增加菊花花色类型,研究者从其他植物中克隆出花色基因C(如图1),拟将其与质粒(图2)重组,再借助农杆菌导入菊花中。
下列操作与实验目的不符的是()
A.用限制性内切核酸酶EcoRⅠ和DNA连接酶构建重组质粒
B.用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织,将C基因导入细胞
C.在培养基中添加卡那霉素,筛选被转化的菊花细胞
D.用PCR技术检测C基因是否整合到菊花染色体上
5.(福建龙岩模拟)为提高红豆杉细胞培养物中紫杉醇的产量,研究人员构建紫杉醇合成关键酶基因(Bapt)的超表达载体,并将其导入红豆杉细胞,具体流程如图。下列相关说法不正确的是()
A.p1301载体上可能含有增强Bapt基因表达的序列
B.超表达载体中应含有潮霉素抗性基因作为标记基因
C.可使用Bapt基因制成的探针检测过程⑤是否成功
D.工厂化生产紫杉醇需将改造后的红豆杉细胞培养至愈伤组织
6.(湖南联考开学摸底)科学家利用PCR技术扩增人乳头瘤病毒HPV-16L1基因,构建了含HPV-16L1基因的表达载体pBI-L1,经根瘤农杆菌介导转化,获得了转基因烟草植株。该技术利用转基因烟草作为生物反应器,生产出了纯度较高的HPV-16L1蛋白。下列说法错误的是()
A.利用PCR扩增HPV-16L1基因的前提是已知该基因的一段碱基序列
B.构建表达载体pBI-L1时可使用两种不同限制酶以确保正确连接
C.必须选用烟草的受精卵作为受体细胞才能保证每个细胞中含有目的基因
D.可以用抗原—抗体杂交法检测再生植株是否表达出HPV-16L1蛋白
7.(湖南联考开学摸底)某动物体内含有某目的基因,研究者欲将该基因导入大肠杆菌的质粒中保存,该质粒含有氨苄青霉素抗性基因(AmpR)、LacZ基因及一些酶切位点,其结构和简单的操作步骤如图所示。回答下列问题。
注:LacZ基因编码产生的β-半乳糖苷酶可以分解X-gal产生蓝色物质,使菌落呈现蓝色,否则菌落为白色。
(1)保存基因技术的成熟使构建某种生物的基因文库成为可能,重组DNA技术是保存生物基因的关键技术。据图总结在受体菌中保存基因的基本步骤:????(用→将各步骤连接)。
(2)在第③步中,为了使质粒DNA能与目的基因连接,需要在混合物中加入酶。若第②步用同一种限制酶处理质粒和目的基因,仅考虑1个目的基因和1个质粒,则在第③步的混合物中,会形成种含目的基因的重组产物。进行第④步之前一般用Ca2+对大肠杆菌进行处理,目的是?。?
(3)在仅添加了氨苄青霉素的培养基上筛选出的细胞不一定是目的细胞,请说明理由:
?。?
请对筛选目的细胞的操作提出完善意见:??。?
考点三实验:DNA的粗提取与鉴定、DNA片段的扩增及电泳鉴定
8.(江苏苏州质检)下列以洋葱为实验材料进行“DNA的粗提取与鉴定实验”的叙述,正确的是()
A.洋葱研磨液需要用滤纸过滤,以保证提取的DNA量
B.滤液中加入冷酒精后,用玻璃棒搅拌会使DNA的提取量增加
C.向含DNA的滤液中加入2mol/L的NaCl溶液有利于去除杂质
D.用二苯胺试剂鉴定DNA时,需沸水浴加热冷却后再观察颜色变化
9.DNA琼脂糖凝胶电泳的分子筛选效应是指作为支持介质的琼脂糖具有网状结构,使大分子物质在通过时受到较大阻力,借此分
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